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定量PCR的熔解曲线分析和PCRmix的选择
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各位定量PCR的虫侠们： 小虫第一次做定量PCR，关于熔解曲线的分析程序问题很大！我用的是ABI 7900HT仪器，做相对定量的时候，熔解曲线分析程序不能直接加在反应程序后面。程序跑完后，手动开始熔解曲线的分析，用的是仪器自带的默认程序，95度15s，60度15s，95度15s，40个循环。然而此时，问题出现了，仪器自动分析该程序跑完需要7.5小时，我等了3个循环，约用了50分钟。 请做过定量PCR 的虫侠们帮我分析一下，问题到底出在哪里？ --------------------------------我是第一和第二问题的分割线----------------------------------- 另外一个问题，有不带UDG酶的Fast Sybr Green Master Mix的产品么（无论哪家公司）？或者使用带有UDG酶的qPCRmix，而在反应开始之前不设置50度的UDG酶反应，应该不会对反应有太大影响吧？ [ Last edited by xiao7270 on 2012-7-4 at 13:30 ] |
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