| 查看: 1947 | 回复: 6 | ||
[求助]
定量pcr的污染问题
|
|
大家好！最近在做定量，但是不知道什么原因空白对照也出现扩增。情况是这样的：我用CDNA模板做了5个梯度稀释，准备先做标准曲线。出来的结果浓度大的3个模板扩增曲线的ct值都相隔一定值，比较正常；浓度小的那2个曲线较接近了；而且那个空白对照也有扩增。 我分析应该不会是二聚体，因为溶解曲线只有一个峰，而且扩增曲线随着模板浓度的减小而后移。大觉觉得是这样吗？ 我先以为是气溶胶污染，然后换了个地方做，还是有阴性扩增 后来我去别人的实验室做，用的人家的枪和实验室，就没有扩增了 所以我觉得可能是我的枪污染了，我同学的实验室不方便去了，我换了个从没做过分子实验的地方做，又换了我实验室的别的枪做，还是有阴性扩增 最后我买了那种带滤膜的枪头，不知道大家用过吗？就是枪头上有那种滤膜，说是可以防污染的，用了之后还是有阴性扩增。 请问谁知道怎么办啊？或者帮我出出主意啊，我实在是没办法了，每次都有扩增。谢谢大家帮忙！ |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有154人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- RNA出现降解，还能做后面的荧光定量PCR吗？
已经有22人回复
- 求助！关于RT-PCR的问题！
已经有20人回复
- 荧光定量问题
已经有4人回复
- 请教real time pcr问题，谢谢！
已经有10人回复
- 关于real-time PCR温度优化的问题
已经有6人回复
- 【求助/交流】实时定量pcr引物设计问题？是否一定要跨内含子！
已经有3人回复
- 【求助/交流】荧光定量PCR？
已经有7人回复
- 【求助/交流】PCR阴性对照总有扩增产物 都有哪些可能？
已经有6人回复
- 【求助/交流】荧光定量pcr
已经有11人回复
- 【专题】PCR实验技术指南
已经有535人回复
2楼2011-04-18 16:32:36
3楼2011-04-19 09:58:49
tingspdf
至尊木虫 (著名写手)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 11292.8
- 散金: 137
- 红花: 3
- 帖子: 2033
- 在线: 1241.2小时
- 虫号: 875792
- 注册: 2009-10-18
- 专业: 环境微生物学
4楼2011-04-19 11:10:46
西瓜
荣誉版主 (知名作家)
- MolEPI: 50
- 应助: 94 (初中生)
- 贵宾: 3.157
- 金币: 1849.6
- 散金: 11458
- 红花: 116
- 沙发: 21
- 帖子: 7553
- 在线: 1449.5小时
- 虫号: 271749
- 注册: 2006-08-13
- 性别: GG
- 专业: 细胞衰老
- 管辖: 分子生物
5楼2011-04-19 14:15:51
lanhuaorchid
金虫 (著名写手)
orchid
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 4218.1
- 帖子: 1488
- 在线: 124.5小时
- 虫号: 1301596
- 注册: 2011-05-20
- 性别: MM
- 专业: 微生物遗传育种学
6楼2012-03-27 16:26:39
7楼2012-06-07 14:37:29
25