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candy845

木虫 (正式写手)

[求助] qPCR结果分析,相对定量

各位虫友,我研究了一个蛋白对细胞的作用,有1,2,3,4依次增加的四个梯度浓度,按着理论,应该是随浓度增加而相关基因mRNA下调,但是我做了qPCR之后,结果是实验组(2.3.4)比对照组1高,浓度3比2低,3和4差不多,检测时间点是24h,请问各位高手,结果该如何分析或解释?
谢谢
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candy845

木虫 (正式写手)

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2楼2013-04-25 08:03:17
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czfscf

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
candy845: 金币+3, ★有帮助, 都是一批次做的,内参是GAPDH 2013-04-25 09:12:31
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-04-25 11:05:10
内参基因是什么呢 内参基因不稳定也有可能啊 肌动蛋白?还是pgk?而且最好是一次性的全批处理,不要分开弄啊,另外你的时间点 是不是在提前一些
Ecological Genomics;the scientific walking hormone
3楼2013-04-25 09:08:10
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senix

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
candy845: 金币+2, ★有帮助 2013-04-25 15:46:21
重复次数也很重要!qPCR有很多偶然因素!
做实验就是和上帝玩游戏!
4楼2013-04-25 09:41:13
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