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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » mRNA水平和蛋白水平不一致如何解释
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elyn-yu

木虫 (初入文坛)

[求助] mRNA水平和蛋白水平不一致如何解释 已有2人参与

我做的realtime PCR结果是mRNA水平呈时间依赖性降低，而蛋白是先降后后升，请各位高手帮忙解释下，有参考文献的希望能提供题目，当然有全文最好了，感激不尽啊！
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1楼 2012-04-08 21:21:28
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
elyn-yu: 金币+1 2012-04-10 14:38:12
还是转录后调控的问题，以前做实验QPCR的结果投稿，审稿人就质疑这个问题，mRNA水平不能代表最终蛋白表达水平
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
8楼2012-04-09 16:20:40
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hejp03

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-04-10 09:27:53
elyn-yu: 金币+1 2012-04-10 14:38:24
这个正常。
1. mRNA翻译成蛋白需要时间，所以会有延迟
2. mRNA转录后调控
3. mRNA自身就受一些分子调控，如miRNA
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9楼2012-04-09 23:30:45
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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elyn-yu: 金币+2 2012-04-09 08:30:42
如果real time PCR的和蛋白的结果非常可靠的话，那就只能是转录后调控的结果了。

不知lz的蛋白是怎样定量的？

real time PCR用的是相对定量还是绝对定量？
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我有一个梦想，我梦想有一天，我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力，居住在自己愿意居住的地方。
2楼2012-04-08 21:48:32
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elyn-yu

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhaohq1209 at 2012-04-08 21:48:32:
如果real time PCR的和蛋白的结果非常可靠的话，那就只能是转录后调控的结果了。

不知lz的蛋白是怎样定量的？

real time PCR用的是相对定量还是绝对定量？

蛋白用BCA试剂盒定量的，PCR是按1ug逆转的，结果都是重复了多次的。
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3楼2012-04-09 08:30:35
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by elyn-yu at 2012-04-09 08:30:35:
蛋白用BCA试剂盒定量的，PCR是按1ug逆转的，结果都是重复了多次的。

lz用这两种方法检测的是哪个基因？有没有此基因对应的表型变化情况？
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我有一个梦想，我梦想有一天，我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力，居住在自己愿意居住的地方。
4楼2012-04-09 08:47:45
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain
不一致，可以理解啊
现在很多人都开始做蛋白芯片了，因为即使基因变了，但最终蛋白的量不变，还是不行的。蛋白才是最终起作用的，蛋白的活性变化等等是关键
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我的路靠我的脚踩出来！！！不走寻常路！！！
5楼2012-04-09 10:22:08
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whb21

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
elyn-yu: 金币+1 2012-04-10 14:37:51
在真核生物中mRNA要经过加工之后才能去翻译合成蛋白质，所以得到这样的结果我觉得是正常的，我曾经做细胞因子检测也得到过类似的结果
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6楼2012-04-09 12:04:11
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thinkdoll

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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elyn-yu: 金币+2 2012-04-10 14:38:00
1. 基因从mRNA翻译成蛋白质是有一个滞后的
2. mRNA降解速率很快的，而蛋白一般来说降解速率慢很多。所以，有一个累积的效果。

ps：你的western显示蛋白的量是先降低后升高？还是由低到高？
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7楼2012-04-09 13:27:11
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elyn-yu

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by thinkdoll at 2012-04-09 13:27:11:
1. 基因从mRNA翻译成蛋白质是有一个滞后的
2. mRNA降解速率很快的，而蛋白一般来说降解速率慢很多。所以，有一个累积的效果。

ps：你的western显示蛋白的量是先降低后升高？还是由低到高？

显示的蛋白水平是先降后升
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10楼2012-04-10 14:32:25
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