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elyn-yu

木虫 (初入文坛)

[求助] mRNA水平和蛋白水平不一致如何解释已有2人参与

我做的realtime PCR结果是mRNA水平呈时间依赖性降低,而蛋白是先降后后升,请各位高手帮忙解释下,有参考文献的希望能提供题目,当然有全文最好了,感激不尽啊!
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starseacow

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elyn-yu: 金币+1 2012-04-10 14:38:12
还是转录后调控的问题,以前做实验QPCR的结果投稿,审稿人就质疑这个问题,mRNA水平不能代表最终蛋白表达水平
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
8楼2012-04-09 16:20:40
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hejp03

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-04-10 09:27:53
elyn-yu: 金币+1 2012-04-10 14:38:24
这个正常。
1. mRNA翻译成蛋白需要时间,所以会有延迟
2. mRNA转录后调控
3. mRNA自身就受一些分子调控,如miRNA
9楼2012-04-09 23:30:45
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普通回帖

zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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elyn-yu: 金币+2 2012-04-09 08:30:42
如果real time PCR的和蛋白的结果非常可靠的话,那就只能是转录后调控的结果了。

不知lz的蛋白是怎样定量的?

real time PCR用的是相对定量还是绝对定量?
我有一个梦想,我梦想有一天,我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力,居住在自己愿意居住的地方。
2楼2012-04-08 21:48:32
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elyn-yu

木虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhaohq1209 at 2012-04-08 21:48:32:
如果real time PCR的和蛋白的结果非常可靠的话,那就只能是转录后调控的结果了。

不知lz的蛋白是怎样定量的?

real time PCR用的是相对定量还是绝对定量?

蛋白用BCA试剂盒定量的,PCR是按1ug逆转的,结果都是重复了多次的。
3楼2012-04-09 08:30:35
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by elyn-yu at 2012-04-09 08:30:35:
蛋白用BCA试剂盒定量的,PCR是按1ug逆转的,结果都是重复了多次的。

lz用这两种方法检测的是哪个基因?有没有此基因对应的表型变化情况?
我有一个梦想,我梦想有一天,我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力,居住在自己愿意居住的地方。
4楼2012-04-09 08:47:45
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain

不一致,可以理解啊
现在很多人都开始做蛋白芯片了,因为即使基因变了,但最终蛋白的量不变,还是不行的。蛋白才是最终起作用的,蛋白的活性变化等等是关键
我的路靠我的脚踩出来!!!不走寻常路!!!
5楼2012-04-09 10:22:08
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whb21

木虫 (著名写手)

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感谢参与,应助指数 +1
elyn-yu: 金币+1 2012-04-10 14:37:51
在真核生物中mRNA要经过加工之后才能去翻译合成蛋白质,所以得到这样的结果我觉得是正常的,我曾经做细胞因子检测也得到过类似的结果
6楼2012-04-09 12:04:11
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thinkdoll

金虫 (小有名气)

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★ ★
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elyn-yu: 金币+2 2012-04-10 14:38:00
1. 基因从mRNA翻译成蛋白质是有一个滞后的
2. mRNA降解速率很快的,而蛋白一般来说降解速率慢很多。所以,有一个累积的效果。

ps:你的western显示蛋白的量是先降低后升高?还是由低到高?
7楼2012-04-09 13:27:11
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elyn-yu

木虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by thinkdoll at 2012-04-09 13:27:11:
1. 基因从mRNA翻译成蛋白质是有一个滞后的
2. mRNA降解速率很快的,而蛋白一般来说降解速率慢很多。所以,有一个累积的效果。

ps:你的western显示蛋白的量是先降低后升高?还是由低到高?

显示的蛋白水平是先降后升
10楼2012-04-10 14:32:25
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