| 查看: 1959 | 回复: 17 | |||
[交流]
【求助/交流】抗癌药物-凋亡-western
|
|||
|
大家好，我是western得新手，最近在做一个化合物的抗癌作用，关于促进凋亡的，在做MAPK 通路时，发现了些问题，请大家帮忙解决一下吧，谢谢了 （1）western做出来的结果随着浓度增加，不仅磷酸化的JNK，p38增加，而且总的JNK，p38也升高，这样正常吗？ （2）结果还显示随着浓度增加，磷酸化的ERK1/2降低，总的ERK1/2增加，这样正常吗？ 谢谢大家了。。。。。。。 |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有178人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有7人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 抗癌药物研发人员招聘----百济神州
已经有6人回复
- 【求助/交流】药物致组织细胞凋亡的caspase活性检测需要多大的组织？（昆虫、动物）
已经有9人回复
- 【求助/交流】细胞水平 筛选活性单体
已经有4人回复
- 【有奖活动】~~~秀出您的美图~~~
已经有28人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
武汉轻工大学化学与环境工程学院廖丽霞副教授招收硕士研究生调剂信息
+1/482
-
谷岩课题组招收调剂同学
+1/187
-
云南民族大学招聘新能源科学与工程、能源动力类专业博士
+1/119
-
广东石油化工学院，材料与化工、能源动力专硕，招收调剂生
+1/93
-
喀什大学环境生态修复功能材料与技术团队接收2026年调剂研究生
+1/44
-
湖北大学生科院邢琼老师课题组招硕士/博士,目前还有调剂名额！
+1/42
-
西南民族大学广招硕士调剂生！快到碗里来！
+1/39
-
0854电子信息调剂，闽南师范大学光电芯片研发小组
+1/37
-
2026年武汉纺织大学材料学院邓波教授团队接收调剂（硕士生4名）
+1/37
-
汕头大研究生调剂招生
+1/33
-
材料/化学/环境 5-10人专硕, A类线，武汉纺织大学材料学院，能源高分子方向
+1/16
-
西安工程大学环化学院能源环境催化与先进材料课题组招收调剂生
+1/11
-
香港科技大学 机器人/生物医学
+1/10
-
重庆工商大学 招收环境/材料类方向调剂研究生
+1/9
-
武汉纺织大学招收化学化工类和材料类研究生调剂生若干名
+1/8
-
齐齐哈尔大学李莉课题组诚招2026级考研调剂生（学硕和专硕）
+1/6
-
英国拉夫堡大学博士招生 电池方向
+1/5
-
上海应用技术大学化工院招收调剂
+1/2
-
2026年北京服装学院- 纺织化学与染整工程-刘老师可招收化学相关专业考研调剂
+1/1
-
天津工业大学双一流高校招博士、调剂硕士、博士后
+1/1
2楼2011-03-23 09:15:42
4楼2011-03-23 09:36:34
5楼2011-03-25 08:24:00
6楼2011-03-25 13:38:58
7楼2011-03-25 16:47:56
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+8): good 2011-03-26 08:46:30
lv840716(金币+5): 2011-03-26 13:30:28
dhd997(金币+8): good 2011-03-26 08:46:30
lv840716(金币+5): 2011-03-26 13:30:28
|
有变化是好事啊，就怕没有变化呢。首先你要确定这个变化的稳定性，你的需要重复实验三次左右，每次run gel的时候 loading control和target protein都要在一张膜上进行western，要保证你的loading control bands很平，这样才能证明结果的可信性。 确定结果可信后，这个结果就是很不错的了。总蛋白浓度的变化和磷酸化水平的变化不一致是很正常的现象。总蛋白浓度的升高可以有两种方式：一种是转录水平的提高，这个不能用western来证明，需要做RTPCR来检测mRNA水平。另一种是转录后调控造成的总蛋白浓度变化，比如negative regulateor或者positive regulateor蛋白的浓度或活性的变化造成的，或者是蛋白本身进行转录后修饰后在细胞内half-life period的变化。 而磷酸化其实就是蛋白转录后修饰的一种，一般的是在你加药物后改变了细胞内环境，触发了某条信号通路，激活了一些上游的激酶，这些激酶进而磷酸化了下游的蛋白。这个过程跟总蛋白浓度的变化没有必然的联系的。磷酸化的作用也是多元化的，有些是改变蛋白的生物活性，有些是改变蛋白的稳定性和细胞内定位。 要解释你的现象你需要对相关的信号通路有足够的了解，而且光一个western是不够的，你可能需要对你怀疑的相关信号蛋白都做western，或者做一些RTPCR实验。 |
8楼2011-03-26 08:33:58
9楼2011-03-26 08:57:47
10楼2011-03-26 13:35:14
★ ★ ★ ★ ★ ★
lv840716(金币+5): 谢谢 2011-03-27 09:10:10
dhd997(金币+6): good 2011-03-27 16:25:22
lv840716(金币+5): 谢谢 2011-03-27 09:10:10
dhd997(金币+6): good 2011-03-27 16:25:22
|
在讨论药物对肿瘤细胞的signal pathway影响的时候哪有什么一般而言啊。。。肿瘤细胞本身就是disorder的，而药品更是种类繁多，除非你看到别人跟你用一样的cell line。一样的treatment condition。否则就不要轻易否定自己的实验结果。总蛋白水平和转录后修饰反应是信号转导研究中很普遍的两个研究对象了，MAPK我没自己动手检测过不敢说，我自己做的P53pathway就是很好的例子，受外源胁迫信号刺激后，细胞的反应往往都是总蛋白浓度和转录后修饰同时变化的。。这个是很常见的。很多文章发现某药物对蛋白总浓度和磷酸化同时有影响或是某一个有影响另一个无影响的都只是只给个result，都不做过多的discussion了，因为这种波动性太常见了。。真要解释起来却又很难，大多数都是一些猜测和假说了。 |
13楼2011-03-26 15:31:51
14楼2011-03-27 09:13:30
15楼2011-03-27 14:49:22
16楼2011-03-27 15:13:56
17楼2011-03-28 11:58:07
18楼2012-04-25 13:33:41
简单回复
zyxme3楼
2011-03-23 09:23
回复
zyxme11楼
2011-03-26 13:58
回复
lv840716(金币+1):谢谢参与
xiaovae12楼
2011-03-26 14:42
回复
lv840716(金币+1):谢谢参与
