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lv840716

银虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】抗癌药物-凋亡-western

大家好，我是western得新手，最近在做一个化合物的抗癌作用，关于促进凋亡的，在做MAPK 通路时，发现了些问题，请大家帮忙解决一下吧，谢谢了
（1）western做出来的结果随着浓度增加，不仅磷酸化的JNK，p38增加，而且总的JNK，p38也升高，这样正常吗？
（2）结果还显示随着浓度增加，磷酸化的ERK1/2降低，总的ERK1/2增加，这样正常吗？
谢谢大家了。。。。。。。

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1楼 2011-03-22 22:51:43

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terry130

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★
lv840716(金币+5): 谢谢 2011-03-27 09:10:10
dhd997(金币+6): good 2011-03-27 16:25:22

引用回帖:

Originally posted by lv840716 at 2011-03-26 13:35:14:
我们一般判定MAPK通路活化的指标，不是一般都是
原型指标浓度不变，磷酸化的指标浓度增高吗？我看大量的文献都是这样描述的，再次请教。。。。。

在讨论药物对肿瘤细胞的signal pathway影响的时候哪有什么一般而言啊。。。肿瘤细胞本身就是disorder的，而药品更是种类繁多，除非你看到别人跟你用一样的cell line。一样的treatment condition。否则就不要轻易否定自己的实验结果。总蛋白水平和转录后修饰反应是信号转导研究中很普遍的两个研究对象了，MAPK我没自己动手检测过不敢说，我自己做的P53pathway就是很好的例子，受外源胁迫信号刺激后，细胞的反应往往都是总蛋白浓度和转录后修饰同时变化的。。这个是很常见的。很多文章发现某药物对蛋白总浓度和磷酸化同时有影响或是某一个有影响另一个无影响的都只是只给个result，都不做过多的discussion了，因为这种波动性太常见了。。真要解释起来却又很难，大多数都是一些猜测和假说了。