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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » mRNA水平和蛋白水平不一致如何解释
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elyn-yu

木虫 (初入文坛)
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8楼: Originally posted by starseacow at 2012-04-09 16:20:40:
还是转录后调控的问题，以前做实验QPCR的结果投稿，审稿人就质疑这个问题，mRNA水平不能代表最终蛋白表达水平

我们也是这样的认为的，但写讨论的时候最好不是有文正提供证据吗，大侠有文章可供参考的吗？
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11楼2012-04-10 14:33:47
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elyn-yu

木虫 (初入文坛)
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4楼: Originally posted by zhaohq1209 at 2012-04-09 08:47:45:
lz用这两种方法检测的是哪个基因？有没有此基因对应的表型变化情况？

该基因是有不同形式存在的，这一点已经写在讨论里了
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12楼2012-04-10 14:36:47
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elyn-yu

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by telomerase at 2012-04-09 10:22:08:
不一致，可以理解啊
现在很多人都开始做蛋白芯片了，因为即使基因变了，但最终蛋白的量不变，还是不行的。蛋白才是最终起作用的，蛋白的活性变化等等是关键

13楼2012-04-10 14:37:07
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elyn-yu

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by whb21 at 2012-04-09 12:04:11:
在真核生物中mRNA要经过加工之后才能去翻译合成蛋白质，所以得到这样的结果我觉得是正常的，我曾经做细胞因子检测也得到过类似的结果

14楼2012-04-10 14:37:44
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lzh860801

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by elyn-yu at 2012-04-09 08:30:35:
蛋白用BCA试剂盒定量的，PCR是按1ug逆转的，结果都是重复了多次的。

相当的不能理解 蛋白用BCA试剂盒定量？你的蛋白样品是单一的？不是混合的？PCR按1ug逆转录并不表示你的cDNA是一样得 还要做内参。总之，按照LZ的描述，我自己理解起来时你的PCR还需要做内参来分析，而你的蛋白定量如果是混合样那显然BCA是不行的。
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15楼2012-04-10 17:06:19
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elyn-yu

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
15楼: Originally posted by lzh860801 at 2012-04-10 17:06:19:
相当的不能理解 蛋白用BCA试剂盒定量？你的蛋白样品是单一的？不是混合的？PCR按1ug逆转录并不表示你的cDNA是一样得 还要做内参。总之，按照LZ的描述，我自己理解起来时你的PCR还需要做内参来分析，而你的蛋白定 ...

所有的PCR和WB都有内参的，都是标化后的结果
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16楼2012-04-11 08:43:10
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

转录水平调控、转录后水平、翻译水平调控、翻译后水平调控是真核基因表达调控的不同水平，举几个最简单的例子：1.蛋白质的稳定性不同，即使同样数量的被表达的A和B两种蛋白质（加入两者的mRNA数量的确相同），A的半衰期极短，一分钟就挂了一半，B一周挂不了30%，那么当然测定时A和B两种蛋白质的最终存活量不同；2.A和B两者的mRNA数量的确相同，但是两种mRNA的密码子对于核糖体的偏好性完全不同（假定两种mRNA的长度相同），那么翻译效率当然也不同；3.A和B两者的mRNA数量的确相同，但是A mRNA上有riboswitch，也是活该倒霉，有是A mRNA上有riboswitch和B正好在翻译时，riboswitch由于效应物而关闭了翻译A mRNA，那么两者的基因产物的量初始就不同，真核生物也有riboswitch结构。。。
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17楼2014-07-11 00:12:05
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)
要具体解释楼主的问题，那就要楼主提供相关的详细信息，不然写一本书也写不完。
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18楼2014-07-11 00:15:56
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美丽魔鬼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我也遇到同样的问题，不知道楼主是怎么解决的？有没有参考文献之类的？有的话，能否给我一份，谢谢！ 我的邮箱，xinxiu08094070@126.com。非常非常感谢！
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19楼2015-02-02 14:18:26
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暮倚修竹

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
19楼: Originally posted by 美丽魔鬼 at 2015-02-02 14:18:26
我也遇到同样的问题，不知道楼主是怎么解决的？有没有参考文献之类的？有的话，能否给我一份，谢谢！ 我的邮箱，xinxiu08094070@126.com。非常非常感谢！

楼主你有参考文献了么？   我的文章也需要回答这个问题  能否发我一份
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20楼2015-09-14 22:19:59
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