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elyn-yu

木虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by starseacow at 2012-04-09 16:20:40:
还是转录后调控的问题,以前做实验QPCR的结果投稿,审稿人就质疑这个问题,mRNA水平不能代表最终蛋白表达水平

我们也是这样的认为的,但写讨论的时候最好不是有文正提供证据吗,大侠有文章可供参考的吗?
11楼2012-04-10 14:33:47
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elyn-yu

木虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zhaohq1209 at 2012-04-09 08:47:45:
lz用这两种方法检测的是哪个基因?有没有此基因对应的表型变化情况?

该基因是有不同形式存在的,这一点已经写在讨论里了
12楼2012-04-10 14:36:47
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elyn-yu

木虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by telomerase at 2012-04-09 10:22:08:
不一致,可以理解啊
现在很多人都开始做蛋白芯片了,因为即使基因变了,但最终蛋白的量不变,还是不行的。蛋白才是最终起作用的,蛋白的活性变化等等是关键

13楼2012-04-10 14:37:07
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elyn-yu

木虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by whb21 at 2012-04-09 12:04:11:
在真核生物中mRNA要经过加工之后才能去翻译合成蛋白质,所以得到这样的结果我觉得是正常的,我曾经做细胞因子检测也得到过类似的结果

14楼2012-04-10 14:37:44
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lzh860801

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by elyn-yu at 2012-04-09 08:30:35:
蛋白用BCA试剂盒定量的,PCR是按1ug逆转的,结果都是重复了多次的。

相当的不能理解 蛋白用BCA试剂盒定量?你的蛋白样品是单一的?不是混合的?PCR按1ug逆转录并不表示你的cDNA是一样得 还要做内参。总之,按照LZ的描述,我自己理解起来时你的PCR还需要做内参来分析,而你的蛋白定量如果是混合样那显然BCA是不行的。
15楼2012-04-10 17:06:19
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elyn-yu

木虫 (初入文坛)

引用回帖:
15楼: Originally posted by lzh860801 at 2012-04-10 17:06:19:
相当的不能理解 蛋白用BCA试剂盒定量?你的蛋白样品是单一的?不是混合的?PCR按1ug逆转录并不表示你的cDNA是一样得 还要做内参。总之,按照LZ的描述,我自己理解起来时你的PCR还需要做内参来分析,而你的蛋白定 ...

所有的PCR和WB都有内参的,都是标化后的结果
16楼2012-04-11 08:43:10
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

转录水平调控、转录后水平、翻译水平调控、翻译后水平调控是真核基因表达调控的不同水平,举几个最简单的例子:1.蛋白质的稳定性不同,即使同样数量的被表达的A和B两种蛋白质(加入两者的mRNA数量的确相同),A的半衰期极短,一分钟就挂了一半,B一周挂不了30%,那么当然测定时A和B两种蛋白质的最终存活量不同;2.A和B两者的mRNA数量的确相同,但是两种mRNA的密码子对于核糖体的偏好性完全不同(假定两种mRNA的长度相同),那么翻译效率当然也不同;3.A和B两者的mRNA数量的确相同,但是A mRNA上有riboswitch,也是活该倒霉,有是A mRNA上有riboswitch和B正好在翻译时,riboswitch由于效应物而关闭了翻译A mRNA,那么两者的基因产物的量初始就不同,真核生物也有riboswitch结构。。。
17楼2014-07-11 00:12:05
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

要具体解释楼主的问题,那就要楼主提供相关的详细信息,不然写一本书也写不完。
18楼2014-07-11 00:15:56
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美丽魔鬼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我也遇到同样的问题,不知道楼主是怎么解决的?有没有参考文献之类的?有的话,能否给我一份,谢谢! 我的邮箱,xinxiu08094070@126.com。非常非常感谢!
19楼2015-02-02 14:18:26
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暮倚修竹

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
19楼: Originally posted by 美丽魔鬼 at 2015-02-02 14:18:26
我也遇到同样的问题,不知道楼主是怎么解决的?有没有参考文献之类的?有的话,能否给我一份,谢谢! 我的邮箱,xinxiu08094070@126.com。非常非常感谢!

楼主你有参考文献了么?   我的文章也需要回答这个问题  能否发我一份
20楼2015-09-14 22:19:59
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