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buzaimihuo

金虫 (小有名气)

[求助] 如何提取水稻黄单胞菌的总RNA和纯化mRNA

我刚 刚进实验室,老师就安排了一项任务:查阅水稻黄单胞菌的背景材料和提取总RNA及提纯mRNA的方法,并完成从培养到最后提纯的全部实验方案。我从来没做过提RNA的实验,更别说是细菌的RNA了,而且细菌的mRNA又没有polyA尾巴,找了好多网站,还是不知道该怎么做,是不是从提取到提纯都要用试剂盒,又该用哪个公司的,公司的说明书又在哪能找到,周六就要交报告了,可现在还是思维混乱,不知道从哪找资料,更不知道该怎样设计实验。请大家帮帮我,谢谢了!因为是新手,没有太多金币,请大家多多包涵!
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jiaxinfish

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
buzaimihuo(金币+1): Trizol 只能提总RNA吧,那提纯mRNA呢,不是要去除rRNA吗? 2012-03-02 10:42:39
yon用Trizol,英俊的,Invitrogen公司,或者其他公司的同类产品,都可以。不过还是英俊的好用,不要买sigma的,提出来好像挺多gDNA的,
2楼2012-03-01 19:12:23
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jiaxinfish

金虫 (正式写手)

z再买个提mRNA的kit,我当初用的是Takara的,也还可以,据说Qiagen
d 的也可以。直接从材料里直接提mRNA好像有点难度吧
3楼2012-03-02 19:37:21
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buzaimihuo

金虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by jiaxinfish at 2012-03-02 19:37:21:
z再买个提mRNA的kit,我当初用的是Takara的,也还可以,据说Qiagen
d 的也可以。直接从材料里直接提mRNA好像有点难度吧

用A 公司的应该也可以吧!那我应该怎么培养黄单胞菌呢?用什么培养基?当OD值达到多少才可以进行提取RNA?
4楼2012-03-03 07:00:30
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zhangw

银虫 (小有名气)

你现在怎么样了?材料都找全了么?其实可以提取到总的RNA后用探针抓捕的,就是很麻烦,可能也比较贵。
5楼2012-04-01 16:53:00
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