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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » qPCR结果分析，相对定量
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candy845

木虫 (正式写手)

[求助] qPCR结果分析，相对定量

各位虫友，我研究了一个蛋白对细胞的作用，有1，2，3，4依次增加的四个梯度浓度，按着理论，应该是随浓度增加而相关基因mRNA下调，但是我做了qPCR之后，结果是实验组（2.3.4）比对照组1高，浓度3比2低，3和4差不多，检测时间点是24h，请问各位高手，结果该如何分析或解释？
谢谢
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1楼 2013-04-25 00:45:55
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candy845

木虫 (正式写手)
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2楼2013-04-25 08:03:17
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czfscf

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
candy845: 金币+3, ★有帮助, 都是一批次做的，内参是GAPDH 2013-04-25 09:12:31
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-04-25 11:05:10
内参基因是什么呢 内参基因不稳定也有可能啊 肌动蛋白？还是pgk？而且最好是一次性的全批处理，不要分开弄啊，另外你的时间点 是不是在提前一些
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Ecological Genomics；the scientific walking hormone
3楼2013-04-25 09:08:10
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senix

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
candy845: 金币+2, ★有帮助 2013-04-25 15:46:21
重复次数也很重要！qPCR有很多偶然因素！
赞一下 回复此楼
做实验就是和上帝玩游戏！
4楼2013-04-25 09:41:13
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