应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助PCR结果分析~~~
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 1377  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

xiaowo1127

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

[交流] 求助PCR结果分析~~~

请问各位大侠，为什么我的PCR结果是这样的。每次P完的结果都是有两条条带，我这样的结果，应该怎样进行改正才能P出完美的结果呢，请各位高手指教~~~
这个是我的PCR条件：
预变性94℃ 5min  
30个循环 94℃ 30s、 55℃ 30s 、72℃ 30s   
最后的延伸72℃ 5min
PCR反应体系：20uL
Taq酶：0.1 uL
10*PCR buffer：2uL
dNTP：0.5uL
引物各0.5uL
DNA：0.5 uL  
剩下的用双蒸水补全
求助PCR结果分析~~~
IMG_0421111111.JPG
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2013-09-17 20:23:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaowo1127

管理员

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
3楼: Originally posted by bujunyang at 2013-09-17 21:33:33
最下面的一条带一般是引物二聚体或非特异带。当你需要某个目的片段时，引物的选择是受到限制的，因此往往我们用的引物回存在形成二聚体、二级结构等很多问题。我不明白你做pcr是为了获得一个目的片段呢还是为了得到 ...

您好，谢谢你的回复，最好是两个都能达到，我希望目的条带能更亮一些，并且可以消除引物二聚体
赞一下 回复此楼
7楼2013-11-06 19:46:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

yilunanxia

兑换贵宾

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-09-18 10:23:27
xiaowo1127: 金币+1 2013-11-06 19:43:45
最下面一行可以无视存在，当然如果楼主想要去除下面的条带的话可以尝试一下降低引物和dNTP的浓度。
赞一下 回复此楼
2楼2013-09-17 21:26:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bujunyang

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2013-09-18 10:23:35
xiaowo1127: 金币+5 2013-11-06 19:44:05
最下面的一条带一般是引物二聚体或非特异带。当你需要某个目的片段时，引物的选择是受到限制的，因此往往我们用的引物回存在形成二聚体、二级结构等很多问题。我不明白你做pcr是为了获得一个目的片段呢还是为了得到一个perfect的图片？
赞一下 回复此楼
3楼2013-09-17 21:33:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvshilu

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2013-09-18 10:23:42
你好！我的几点建议，敬请参考：
1. 调整模板的量，建议：稀释10被，100倍；或者增加1倍，2倍，5倍，10倍。你的问题是目的条带较浅，而不是后面的引物二聚体。
2. 做TM梯度，怀疑你的TM较高，但有时也说不准，实验嘛做了才知道，可以做TM梯度。
赞一下 回复此楼
5楼2013-09-18 09:29:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
廖志琴lzq4楼
2013-09-18 08:17   回复  
引用回帖:
3楼: Originally posted by bujunyang at 2013-09-17 21:33:33 最下面的一条带一般是引物二聚体或非特异带。当你需要某个目的片段时，引物的选择是受到限制的，因此往往我们用的引物回存在形成二聚体、二级结构等很多问题。我不明白你做pcr是为了获得一个目的片段呢还是为了得到 ...

查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 285求调剂 +3 AZMK 2026-04-01 3/150 2026-04-01 11:31 by wangjy2002
[考研] 292求调剂 +8 木虫er12138 2026-04-01 8/400 2026-04-01 11:23 by wangjy2002
[考研] 环境工程调剂 +7 hyzzzzzzz. 2026-04-01 7/350 2026-04-01 10:42 by 给你你注意休息
[考研] 一志愿北京科技大学085601材料工程英一数二初试总分335求调剂 +5 双马尾痞老板2 2026-03-31 5/250 2026-04-01 09:04 by oooqiao
[考研] 调剂申请 +8 张张张张zy 2026-03-31 9/450 2026-04-01 08:29 by zjbkx
[考研] 322求调剂 +4 熹僖XX 2026-03-31 4/200 2026-04-01 08:21 by JourneyLucky
[电化学] 070300化学调剂 +7 山顶见α 2026-03-25 7/350 2026-03-31 22:21 by piaoyi415
[考研] 070300化学354求调剂 +15 101次希望 2026-03-28 15/750 2026-03-31 17:58 by jp9609
[考研] 求调剂 +9 akdhjs 2026-03-31 10/500 2026-03-31 17:14 by zhyzzh
[考研] 317求调剂 +12 蛋黄咸肉粽 2026-03-26 13/650 2026-03-31 16:44 by asdfzly
[考研] 0856 335分 | 封装or激光加工 老师看看我！！ +9 cccchenso 2026-03-29 9/450 2026-03-31 16:37 by lishahe
[考研] 材料与化工272求调剂 +25 阿斯蒂芬2004 2026-03-28 25/1250 2026-03-31 16:27 by hypershenger
[考研] 263求调剂 +3 DDDDuu 2026-03-27 3/150 2026-03-31 16:21 by 土木硕士招生
[考研] 367求调剂 +7 芋泥啵啵… 2026-03-28 7/350 2026-03-31 14:55 by 不吃魚的貓
[考研] 266分，求材料相关专业调剂 +10 哇呼哼呼哼 2026-03-30 12/600 2026-03-31 11:00 by 熊一刀
[考研] 320分，材料与化工专业，求调剂 +10 一定上岸aaa 2026-03-27 14/700 2026-03-31 10:47 by foria
[考研] 本科211总分289，08工学真心求调剂 +3 utopiaE 2026-03-30 3/150 2026-03-30 23:42 by ms629
[考研] 297求调剂 +17 田洪有 2026-03-26 18/900 2026-03-30 18:32 by nothing投稿中
[考研] 303求调剂 +7 DLkz1314. 2026-03-30 7/350 2026-03-30 16:05 by shuang5186
[考研] 327求调剂 +6 汲亦昊 2026-03-29 6/300 2026-03-29 13:40 by peike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭