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求助PCR结果分析~~~
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xiaowo1127
铜虫
(初入文坛)
应助: 0
(幼儿园)
金币: 181.1
帖子: 30
在线: 43.1小时
虫号: 1863507
[交流]
求助PCR结果分析~~~
请问各位大侠,为什么我的PCR结果是这样的。每次P完的结果都是有两条条带,我这样的结果,应该怎样进行改正才能P出完美的结果呢,请各位高手指教~~~
这个是我的PCR条件:
预变性94℃ 5min
30个循环 94℃ 30s、 55℃ 30s 、72℃ 30s
最后的延伸72℃ 5min
PCR反应体系:20uL
Taq酶:0.1 uL
10*PCR buffer:2uL
dNTP:0.5uL
引物各0.5uL
DNA:0.5 uL
剩下的用双蒸水补全
IMG_0421111111.JPG
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2013-09-17 20:23:13
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bujunyang
木虫
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在线: 205.8小时
虫号: 808463
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流!
2013-09-18 10:23:35
xiaowo1127: 金币+5
2013-11-06 19:44:05
最下面的一条带一般是引物二聚体或非特异带。当你需要某个目的片段时,引物的选择是受到限制的,因此往往我们用的引物回存在形成二聚体、二级结构等很多问题。我不明白你做pcr是为了获得一个目的片段呢还是为了得到一个perfect的图片?
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3楼
2013-09-17 21:33:33
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