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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酶切的片段跑时间长，小片段就没有了
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raulcoco

金虫 (小有名气)

[交流] 酶切的片段跑时间长，小片段就没有了 已有5人参与

   一个很难做的clone，总算有点眉目了

但是不知道为什么，最后的质粒转化以后，挑单菌落，摇菌，提质粒，酶切之后，时间一长，小的片段就不见了，什么原因呢 ？

见下图
跑了30分钟之后，小的片段就没有了

15分钟的时候，还是能看到片段的，而且片段大小是对的
酶切的片段跑时间长，小片段就没有了
20130704.jpg
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只想给漂泊的文章找个家～～～
1楼 2013-07-07 14:04:17
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可以在跑胶时，在下方的电泳槽里加一点EB，这样小片段可以看得清楚一点
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
3楼2013-07-07 18:03:27
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yb19841014

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 是的，小片段换算出来的质量比较少，加上跑时间长，胶下部的EB往上跑没了，所以最后染色就会比较浅 2013-07-07 17:33:53
小片段的浓度不够高啊
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2楼2013-07-07 16:41:25
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Arrennew

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★
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kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-07-08 08:58:08
我觉得你提问的问题不一定存在！可能你忽略了什么细节，作为一个科研工作者，要想确定是时间的问题对照应该这样设：同一份酶切质粒分两份，先点一份跑电泳，15分钟以后再点另一份，再跑15分钟 （保证酶切产物，胶，电泳条件，染色条件相同），如果还能得到这种结果，我表示非常感兴趣！
不过就工作效率来考虑，我建议测序。
单酶切？看大小还不包括启动子，方向怎么确定的？
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生命不息，探索不止。
4楼2013-07-07 18:43:27
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tiansiqin

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
通常跑胶时间过长条带会被稀释，你可以试一试使用EB
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学会成长为自己的样子
5楼2013-07-15 10:53:20
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