| 查看: 3505 | 回复: 12 | |||
[求助]
跑电泳的一点小疑问
|
|||
|
跑电泳时点样先加buffer还是DNA样本？ 师兄说最好是把凝胶放在缓冲液里面点样，有什么好处？ 下面是小生酶切DNA后跑电泳的图，先buffer后DNA，从右往左点样的，为什么buffer的带子右边的会比左边的跑的更前呢？还有大神们能看看哪个孔跑的片段更接近300~900bp,还是看不出来？额~  jh 2013-07-03 19 小时 24 分钟_副本.jpg |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 实验求助 |
» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有89人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 胶原蛋白的电泳为什么跑不出来？
已经有21人回复
- 为什么我跑电泳的胶跑不出条带
已经有6人回复
- 我的蛋白电泳，样为什么跑不开。
已经有3人回复
- 关于丙烯酰胺凝胶电泳跑DNA样品的几个问题
已经有9人回复
- 琼脂糖凝胶电泳跑成这样是什么原因？
已经有11人回复
- 求教一个关于SDS-PAGE电泳的问题（电泳条带的重影以及marker最后一条带跑不出来）
已经有5人回复
- PCR后跑电泳，整个泳道都很亮，怎么回事？
已经有5人回复
- 跑电泳
已经有4人回复
- 琼脂糖凝胶电泳跑的时间长了是不是就会出现拖尾呀？
已经有10人回复
- 细菌RNA提取后跑电泳出现一条暗带和在泳道中弥散都是什么原因？
已经有9人回复
- 为什么荧光定量后还要跑电泳呢
已经有15人回复
- 请教盐酸胍助溶冻干蛋白干粉时，羟胺裂解后 ，跑电泳问题！！！！
已经有5人回复
- RNA跑电泳结果
已经有11人回复
- 琼脂糖凝胶电泳，跑的条带有点难看
已经有15人回复
- 怎样跑出电泳图很漂亮？？！！
已经有8人回复
- 请教高手 电泳为什么是蛋白质小分子跑在最下面
已经有10人回复
- 【求助/交流】跑电泳的胶，我是重复利用的！但是跑的条带非常模糊！
已经有21人回复
- 【求助/交流】RNA在跑琼脂糖凝胶电泳过程中会降解吗
已经有27人回复
- 【求助/交流】蛋白跑还原电泳是一条带，但是跑非还原电泳三四条带，怎么使他产生单一�
已经有7人回复
- 【求助/交流】提质粒后跑的电泳图
已经有10人回复
- 【求助/交流】提取的植物基因组DNA电泳图，疑问？？？
已经有17人回复
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
3楼2013-07-03 23:39:15
2楼2013-07-03 20:16:22
4楼2013-07-04 08:47:02
1949stone
荣誉版主 (知名作家)
海纳百川
- MolEPI: 4
- 应助: 95 (初中生)
- 贵宾: 2.38
- 金币: 2506.2
- 散金: 3394
- 红花: 177
- 沙发: 8
- 帖子: 9863
- 在线: 2695.5小时
- 虫号: 765987
- 注册: 2009-05-08
- 性别: GG
- 专业: 药物分析
- 管辖: 分子生物
【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-07-04 10:33:43
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-07-04 10:33:43
|
在电泳液加就可以啊 buffer有沉降的作用 @cicelyzh 的意见很中肯 你的mark跑的有点问题 但是起码条带跑开了 分离度也行 但是你的酶切样本 说句难听的 一塌糊涂 没有您所谓片段 需要重新设计下试验 慢慢摸索下 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
pandashu1988
5楼2013-07-04 09:42:56
6楼2013-07-04 10:05:17
yilunanxia
金虫 (正式写手)
- 应助: 37 (小学生)
- 金币: 816.9
- 散金: 269
- 红花: 2
- 帖子: 334
- 在线: 352.3小时
- 虫号: 1797048
- 注册: 2012-05-05
- 专业: 环境微生物学
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-07-04 10:33:51
1949stone: 回帖置顶 2013-07-04 10:37:10
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-07-04 10:33:51
1949stone: 回帖置顶 2013-07-04 10:37:10
|
跑电泳时点样时是先将DNA模板与loading buffer混合再加样。 师兄说最好是把凝胶放在缓冲液里面点样，是因为loading buffer的一个作用是使DNA在液体中沉降到底部。如果不在缓冲溶液里，那loading buffer的沉降作用就无法体现。 我不确定你这些是不是一种样，但是可以肯定的是你的样本都朝着一个方向倾斜，不确定是你的电泳槽的问题还是你把胶放在电泳槽一侧的原因导致的。 至于片段大小无法判断，因为你的marker的各个条带大小都不确定。 |
7楼2013-07-04 10:17:54
8楼2013-07-04 14:26:28
，这个不是PCR产物，是直接提取总DNA割胶回收后酶切的，因为电泳检测看到有拖带~但是没有割胶回收直接把总DNA酶切的话就能在想要的片段大小那里看到明亮条带。。。所以很纠结，难道是DNA量不够，打算把回收的DNA P一下再来酶切看看 9楼2013-07-04 14:29:56
10楼2013-07-04 14:43:12
