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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 7kb的片段用PCR能P得出来么？
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zjhn

铁虫 (小有名气)

[求助] 7kb的片段用PCR能P得出来么？

7kb的片段用PCR能P得出来么？还有其他方法么？
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1楼2013-01-28 17:56:11
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)
现在一直用phusion 以前也用过pfu ultraII
没有特别注意的地方。 20-25个循环后，纯化，dpnI切两小时，转化。
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7楼2013-01-29 11:40:30
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mondy1981

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zjhn: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-01-29 09:15:39
可以用Roche long template pcr kit or 分段p，然后连起来
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2楼2013-01-28 20:31:24
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zjhn: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-01-29 09:15:49
可以 做点突变的时候 经常PCR 7K的质粒。
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3楼2013-01-28 22:19:21
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WilliamHJ

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zjhn: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-01-29 09:15:55
理论上是可以的，条件严格一点，用的酶好一点的话就行，现在全质粒pcr已经比较成熟了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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学习中
4楼2013-01-28 22:31:34
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