应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 嵌套PCR引物如何设计？目的片段434bp
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
71/1返回列表
查看: 2681  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

sxxuan

金虫 (著名写手)

[求助] 嵌套PCR引物如何设计？目的片段434bp

最近要自己设计引物拼接一段序列，全长434bp，是不是要合成若干对重叠的引物进行扩增？没接触过这方面的实验，请大家帮忙呀～
GACAAGGAAGATGCAGCTAGTGGCTGAATGGAGTGGCTGTGTGGAGTGGCACCCAGAACTGATGAATGAAGGTGGAGAGGTGAGCCTGCGGGTCCGGCAGGACTCAATGGGAAACTTCCACCTGACAGAGCTTGAGAAAGAGGAGAGAGTGATGGCTTTCTGGCTGCTGGCAGGACTAGCGGCTTCGGCCTTCCACTGGTCCGGCATCCTTGGTGTGATGGGATTGTGGACGCTGTCGGAAATGCTGAGGAGCTCAATAATCTAAACCCAGACTGTGACAGAGCAAAACCCGGAGGGCTCGTAAAAGATTGTCCGGAACCAAAAGAAAAGCAAGTAACTCACATAGATAGAGCTCGGACTGGAGAGCTCTTTAAACAAAAAAGCCAGAATTGAGCTGAACCTGGAGAGCTCATTAAACATAGTCCAGACAAAAC
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
你的日子如何，你的力量也必如何！
1楼 2012-03-31 16:34:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+2, 鼓励应助 2012-04-01 17:34:44
嵌套PCR就是巢式PCR，如果是巢式PCR就是第一轮PCR扩增选用最外围的引物，回收预期大小目的片段后，在通过一轮靠内的引物扩增若第二轮产物也出现预期的大小可以断定你所获得的片段就是目的片段。 你所说的拼接一段序列，全长434bp我不太明白是啥意思？
赞一下 回复此楼
hehe
2楼2012-04-01 08:39:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sxxuan

金虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lvbobo823 at 2012-04-01 08:39:56:
嵌套PCR就是巢式PCR，如果是巢式PCR就是第一轮PCR扩增选用最外围的引物，回收预期大小目的片段后，在通过一轮靠内的引物扩增若第二轮产物也出现预期的大小可以断定你所获得的片段就是目的片段。 你所说的拼接一段 ...

是不是我理解错了嵌套PCR？其实是我要得到全长434bp的序列，但没有模板，要设计若干对引物，把这段序列拼接出来。谢谢
赞一下 回复此楼
你的日子如何，你的力量也必如何！
3楼2012-04-01 09:22:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
sxxuan: 金币+100, ★有帮助 2012-04-05 09:07:33
没有模板，你可以让公司合成一下，估计DNA片段每个碱基3块左右，合成下来一千多块。用引物不好弄。
赞一下 回复此楼
hehe
4楼2012-04-02 17:36:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sxxuan

金虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lvbobo823 at 2012-04-02 17:36:22:
没有模板，你可以让公司合成一下，估计DNA片段每个碱基3块左右，合成下来一千多块。用引物不好弄。

是啊，扩了几次都不行。估计我老板不同意让公司合成的
赞一下 回复此楼
你的日子如何，你的力量也必如何！
5楼2012-04-02 20:22:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sxxuan

金虫 (著名写手)
不懂得怎么给金币，怎么办？
赞一下 回复此楼
你的日子如何，你的力量也必如何！
6楼2012-04-02 20:23:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
引用回帖:
6楼: Originally posted by sxxuan at 2012-04-02 20:23:37:
不懂得怎么给金币，怎么办？

在每个回帖的右下角,有个"评分"的按钮,点了就可以了.不过有的回帖是"不应助"的,这些帖子就评不了分.
赞一下 回复此楼
7楼2012-04-03 15:03:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sxxuan 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料专硕283求调剂 +9 试试看呗 2026-04-04 10/500 2026-04-04 23:47 by lqwchd
[考研] 285求调剂 +8 哦呦呼o 2026-04-04 8/400 2026-04-04 23:16 by lqwchd
[考研] 材料求调剂 +10 呢呢妮妮 2026-04-01 10/500 2026-04-04 23:12 by 无际的草原
[考研] 求生物学学硕调剂——364分 +7 云朵遛弯指南 2026-04-04 7/350 2026-04-04 22:49 by zhyzzh
[考研] 070300化学学硕311分求调剂 +8 梁富贵险中求 2026-04-04 10/500 2026-04-04 20:57 by imissbao
[考研] 调剂 +4 是可乐不是可乐 2026-04-04 4/200 2026-04-04 19:41 by 唐沐儿
[考研] 一志愿南农090401，268，求调剂 +5 一木鸟然 2026-04-04 5/250 2026-04-04 17:07 by babysonlkd
[考研] 280求调剂 +21 咕噜晓晓 2026-04-02 22/1100 2026-04-04 11:12 by 猪会飞
[考研] 机械专硕297 +3 Afksy 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:24 by 1753564080
[基金申请] 请问共同通讯和共同一作的认可度问题 10+4 psa1234 2026-04-01 10/500 2026-04-03 11:08 by Kittylucky
[考研] 262求调剂 +6 励志一定发文章 2026-04-02 7/350 2026-04-03 09:54 by linyelide
[考研] 一志愿复旦材料，英一专硕，总分357调剂 +4 1050389037 2026-04-02 5/250 2026-04-02 21:40 by dongzh2009
[考研] 一志愿上海海洋大学083200食品学硕，求调剂，接受其他专业 +6 what张 2026-04-01 7/350 2026-04-02 16:48 by zzsw+
[考博] 材料工程专业硕士申博 +3 麟正宇 2026-03-30 3/150 2026-04-02 15:04 by greychen00
[考研] 266分，一志愿电气工程，本科材料，求材料专业调剂 +10 哇呼哼呼哼 2026-04-01 11/550 2026-04-02 11:31 by lnilvy
[考研] 307分求调剂 +14 (o~o) 2026-03-31 15/750 2026-04-01 20:43 by longlotian
[考研] 求0861交通运输专硕or材料专硕调剂 +4 勒布朗@ 2026-03-31 4/200 2026-04-01 09:54 by 一只好果子?
[考研] 085601 329分调剂 +6 yzsa12 2026-03-31 6/300 2026-03-31 15:23 by yanflower7133
[考研] 一志愿中海洋材料357 +4 麦恩莉. 2026-03-30 4/200 2026-03-31 14:35 by 记事本2026
[考研] 材料专硕 085600求调剂 +7 BBQ233 2026-03-30 7/350 2026-03-30 17:44 by oooqiao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭