应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 全质粒PCR引物设计
101/1返回列表
查看: 4526  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

lmzxcom1

金虫 (著名写手)

[求助] 全质粒PCR引物设计

在全质粒上引入1个突变点，有经验的筒子们告知一下设计引物过程中有什么注意事项吧
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-12-22 16:43:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lmzxcom1

金虫 (著名写手)
顶起啊
回复此楼
2楼2011-12-22 21:30:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wanhscn(金币+2): 感谢专家回帖！ 2011-12-23 10:09:34
lmzxcom1(金币+5): ★★★很有帮助 谢谢 2011-12-27 18:16:54
突变位点两端最好各有15个碱基左右配对，突变引物要设计一对，互补关系。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-12-22 22:24:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

c3024034

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wanhscn(金币+1): 感谢参与交流! 2011-12-23 10:09:46
设计一对互补的引物，在突变点两端各有11-15的碱基。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-12-23 09:36:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lmzxcom1

金虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lxj341401 at 2011-12-22 22:24:02:
突变位点两端最好各有15个碱基左右配对，突变引物要设计一对，互补关系。

不互补不行么，我需要同时突变两个位点。如果互补的话，需要PCR两次了
赞一下 回复此楼
5楼2011-12-23 09:49:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lmzxcom1

金虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by c3024034 at 2011-12-23 09:36:44:
设计一对互补的引物，在突变点两端各有11-15的碱基。

不互补不行么，我需要同时突变两个位点。如果互补的话，需要PCR两次了
赞一下 回复此楼
6楼2011-12-23 09:49:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanggl2004

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
采用quicchange的方法，引物设计有个在线网站，http://www.genomics.agilent.com/ ... lQCPD&PageID=15
赞一下(1人) 回复此楼
思考是行动的种子！
7楼2011-12-23 13:43:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

c3024034

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

如果你同时突变两个点的话 必须这两个点很近  不然的话你就需要突变两次
要不你就用quicchange的多点突变试剂盒
赞一下 回复此楼
8楼2011-12-23 14:18:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ALICEzz

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by c3024034 at 2011-12-23 14:18:06
如果你同时突变两个点的话 必须这两个点很近  不然的话你就需要突变两次
要不你就用quicchange的多点突变试剂盒

想问一下  几个碱基以内算是近呢…如果隔开6、7个bp了行不行呢
赞一下 回复此楼
9楼2014-07-17 23:29:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

研究室新生

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by ALICEzz at 2014-07-17 23:29:32
想问一下  几个碱基以内算是近呢…如果隔开6、7个bp了行不行呢...

理论上应该可以。。不过要保证你的3端引物完全匹配比较重要。。。
赞一下 回复此楼
人生是一棵不停生长的树。
10楼2014-08-01 12:15:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lmzxcom1 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 环境领域全国重点实验室招收博士1-2名 +3 QGZDSYS 2026-03-13 3/150 2026-03-18 00:13 by PY-Hzb
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
[考研] 293求调剂 +7 zjl的号 2026-03-16 12/600 2026-03-17 18:22 by 重科小霸王
[考研] 0703化学336分求调剂 +4 zbzihdhd 2026-03-15 5/250 2026-03-17 17:33 by ruiyingmiao
[考研] 材料工程专硕调剂 +5 204818@lcx 2026-03-17 5/250 2026-03-17 17:27 by Little-xue
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +16 不知道叫什么！ 2026-03-15 18/900 2026-03-17 17:05 by ruiyingmiao
[考研] 332求调剂 +6 Zz版 2026-03-13 6/300 2026-03-17 17:03 by ruiyingmiao
[考研] 274求调剂0856材料化工 +13 z2839474511 2026-03-11 14/700 2026-03-17 16:51 by share_joy
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +8 一鸭鸭哟 2026-03-14 10/500 2026-03-17 15:07 by 一鸭鸭哟
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +3 困于星晨 2026-03-17 3/150 2026-03-17 14:08 by ms629
[考博] 26申博 +4 八旬速览 2026-03-16 4/200 2026-03-17 13:00 by 轻松不少随
[考研] 275求调剂 +4 太阳花天天开心 2026-03-16 4/200 2026-03-17 10:53 by 功夫疯狂
[考研] 304求调剂 +4 ahbd 2026-03-14 4/200 2026-03-16 16:48 by 我的船我的海
[考研] 材料工程327求调剂 +3 xiaohe12w 2026-03-11 3/150 2026-03-14 20:20 by ms629
[考研] 330求调剂 +3 ?酱给调剂跪了 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:13 by JourneyLucky
[考研] 招收0805（材料）调剂 +3 18595523086 2026-03-13 3/150 2026-03-14 00:33 by 123%、
[考研] 304求调剂 +6 Mochaaaa 2026-03-12 7/350 2026-03-13 22:18 by 星空星月
[考研] 考研调剂 +4 芬达46 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:04 by ruiyingmiao
[考研] 290求调剂 +3 ADT 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:19 by peike
[考研] 283求调剂，材料、化工皆可 +8 苏打水7777 2026-03-11 10/500 2026-03-13 09:06 by Linda Hu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭