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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 可以环形质粒直接做模板吗
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lly198784

木虫 (正式写手)

[求助] 可以环形质粒直接做模板吗

如题，我是目的片段连接到T载体的，后面要把目的片段改造后从重组质粒上PCR下来，请问可以直接以环形质粒做模板吗？
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1楼 2011-12-09 13:58:25
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peng5053

银虫 (正式写手)

Dr.

【答案】应助回帖

lly198784(金币+1): 2011-12-09 18:52:37
肯定可以啊！环形质粒也可以作为模板的，
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多点思维，多点idea
2楼2011-12-09 15:53:54
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c3024034

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

lly198784(金币+2): 2011-12-09 18:53:05
可以，菌落PCR就是以环状质粒为模板的，重要的是你的引物
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3楼2011-12-09 18:34:34
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lly198784

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by c3024034 at 2011-12-09 18:34:34:
可以，菌落PCR就是以环状质粒为模板的，重要的是你的引物

引物有什么特殊要求吗？
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4楼2011-12-09 18:52:57
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豆豆鱼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-12-09 20:25:59
如果只是检测下是否连接成功，使用通用引物即可，如果是作为模版进行pcr，自己设计合适引物即可，如果需要酶切，再在引物5‘端加酶切位点，其他没有特别要求。
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5楼2011-12-09 18:56:27
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c3024034

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励积极应助！ 2011-12-09 20:26:05
你的引物的位置决定了你PCR 的长度，如果你需要扩正全质粒就设计互补引物，你扩其中一段就只按一般的引物设计就可以了
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6楼2011-12-09 19:39:45
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世外清风

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
lly198784(金币+1): 2011-12-12 12:45:19
肯定可以，而且比基因组上要好扩，特异性要好
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7楼2011-12-10 17:00:01
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liukun261

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
8楼2011-12-10 17:20:50
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
lly198784(金币+1): 2011-12-12 12:45:01
可以    买的基因一般在t载体上   回来转化得质粒  直接pcr
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9楼2011-12-10 17:26:53
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