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lmzxcom1

金虫 (著名写手)

[求助] 全质粒PCR引物设计

在全质粒上引入1个突变点,有经验的筒子们告知一下设计引物过程中有什么注意事项吧
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c3024034

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

如果你同时突变两个点的话 必须这两个点很近  不然的话你就需要突变两次
要不你就用quicchange的多点突变试剂盒
8楼2011-12-23 14:18:06
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wanhscn(金币+2): 感谢专家回帖! 2011-12-23 10:09:34
lmzxcom1(金币+5): ★★★很有帮助 谢谢 2011-12-27 18:16:54
突变位点两端最好各有15个碱基左右配对,突变引物要设计一对,互补关系。
3楼2011-12-22 22:24:02
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c3024034

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wanhscn(金币+1): 感谢参与交流! 2011-12-23 10:09:46
设计一对互补的引物,在突变点两端各有11-15的碱基。
4楼2011-12-23 09:36:44
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lmzxcom1

金虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lxj341401 at 2011-12-22 22:24:02:
突变位点两端最好各有15个碱基左右配对,突变引物要设计一对,互补关系。

不互补不行么,我需要同时突变两个位点。如果互补的话,需要PCR两次了
5楼2011-12-23 09:49:28
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