应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白沉淀后不能复溶~！
51/1返回列表
查看: 4784  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

huangxinqi20

铜虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白沉淀后不能复溶~！

想提取一株短小芽孢杆菌产生的活性蛋白，发酵液中加入硫酸铵使其沉淀，蛋白沉淀加入PBS不能溶解，然后在PBS中透析，透析完了蛋白还是不能复溶，呈胶体状，我试了加NaOH调节ph到12左右才可以使蛋白溶解。但又怕蛋白变性，想问问大家有没有其他办法使其溶解，不然不好上柱分离啊。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-07-10 13:58:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沧海飞雪

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我也是用的硫酸铵沉淀法，沉淀完了想过HPLC分离，但是不知道用什么溶剂能即复溶又适合过柱子！请问楼主的问题是怎么解决的？求帮助！
赞一下 回复此楼
6楼2012-10-18 10:21:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★ ★
西瓜(金币+2): Good 2011-07-10 21:44:37
硫酸铵沉淀的梯度有没有摸索？不会早就失活了吧？
赞一下(1人) 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2011-07-10 18:51:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangxinqi20

铜虫 (初入文坛)
dhd997: 把信息汇总在一楼吧。可以编辑的。 2011-07-11 07:48:44
做了梯度，30%以下没活性，30%-60%的沉淀检测有活性，所以应该没有失活。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-07-10 23:25:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smisuccess

金虫 (小有名气)
引用回帖:
80285楼: Originally posted by huangxinqi20 at 2011-07-10 13:58:04:
想提取一株短小芽孢杆菌产生的活性蛋白，发酵液中加入硫酸铵使其沉淀，蛋白沉淀加入PBS不能溶解，然后在PBS中透析，透析完了蛋白还是不能复溶，呈胶体状，我试了加NaOH调节ph到12左右才可以使蛋白溶解。但又怕蛋白 ...

请问楼主你的蛋白最后溶解了吗，我现在也在做有关蛋白的，也遇到了跟你一样的情况？
赞一下 回复此楼
5楼2012-04-26 16:01:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 能否申诉？ +4 echo8914667 2026-08-30 4/200 2026-08-30 16:03 by sundiv
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 4/200 2026-08-30 13:54 by GkCVyODlx4mR
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-30 11:10 by l0VvVHGBGRLv
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 07:39 by ZPa0EcMwuECS
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 07:28 by ZPa0EcMwuECS
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-30 06:57 by ZPa0EcMwuECS
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 13/650 2026-08-30 05:38 by ZPa0EcMwuECS
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-30 01:45 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +4 tannykie 2026-08-29 4/200 2026-08-29 17:14 by lmz0216
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 基金不中，共勉 +11 eulota 2026-08-26 11/550 2026-08-28 14:22 by 火星超人xi
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 我不理解！ +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 明天应该可查了！？ +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭