24小时热门版块排行榜    

查看: 2238  |  回复: 8

孙金钥

银虫 (正式写手)

[求助] 蛋白沉淀的奇异事件

求助各位大侠:我现在用乙腈沉淀蛋白之后,上清液有点黄,大家有遇到过这种情况吗?另外我再加入了等量的氯仿之后,会有少量沉淀出现还有分层,那分层的物质是油脂还是氯仿?谢过大家了!在其他地方看过说氯仿和乙腈混溶的
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

白水6177

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
孙金钥: 金币+5, ★★★很有帮助, 大哥很强啊! 2012-04-05 07:35:23
孙金钥: 回帖置顶 2012-04-05 07:35:28
现在随着仪器设备的不断精进,对于样品前处理的要求越来越低,越来越不需要顾虑仪器会有检测不到的问题。但是新的思路是,如何能将各种误差降低到最小,将检测值的准确度提高。我同意用已经沉淀蛋白,真正做到蛋白沉淀完全干净没必要,乙腈的沉淀效率还是很高的,一般不少于1.5倍体积,处理后的就可以进质谱了。现在色谱柱和保护柱柱心越来越算做耗材了,节约时间,不对质谱造成多大影响就可以了。
乙腈和水是相混溶的,氯仿和水是分层的,加入氯仿明显将水层会分离出一部分来。至于发现有黄的情况,跟采集的样品有关,无需多虑。
4楼2012-04-03 11:50:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

cj22xmc

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-04-02 11:04:45
氯仿和乙腈是互溶的,和油脂也相溶,怎么分层?
mc
2楼2012-04-02 08:45:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuzhaomin

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-04-02 11:04:51
用乙腈沉淀蛋白最少要3倍体积的乙腈,否则沉淀不完全的,不知道楼主用的几倍量。能固相萃取,不液液萃取,能液液萃取,不沉淀蛋白,一般都选择液液萃取,固相萃取成本太高,沉淀蛋白会比较伤色谱柱。
3楼2012-04-02 09:58:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

孙金钥

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cj22xmc at 2012-04-02 08:45:45:
氯仿和乙腈是互溶的,和油脂也相溶,怎么分层?

是啊,我单独把乙腈和氯仿混匀也不分层,但是如果在血浆中就有油状分层,奇怪啊!
5楼2012-04-05 07:34:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

孙金钥

银虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 白水6177 at 2012-04-03 11:50:47:
现在随着仪器设备的不断精进,对于样品前处理的要求越来越低,越来越不需要顾虑仪器会有检测不到的问题。但是新的思路是,如何能将各种误差降低到最小,将检测值的准确度提高。我同意用已经沉淀蛋白,真正做到蛋白 ...

解决了心头的疑惑啊,谢谢啦!
6楼2012-04-05 07:36:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

孙金钥

银虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by liuzhaomin at 2012-04-02 09:58:38:
用乙腈沉淀蛋白最少要3倍体积的乙腈,否则沉淀不完全的,不知道楼主用的几倍量。能固相萃取,不液液萃取,能液液萃取,不沉淀蛋白,一般都选择液液萃取,固相萃取成本太高,沉淀蛋白会比较伤色谱柱。

谢谢啦,问题已经弄明白啦!
7楼2012-04-05 07:37:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天一生水muse

新虫 (初入文坛)

请问如果蛋白沉淀不完全,会对色谱峰有什么影响吗?
8楼2013-01-07 21:46:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天一生水muse

新虫 (初入文坛)

我用1:1的乙腈沉淀血浆,发现得到的色谱峰与进水煎液得到的色谱峰的保留时间有差别,这是因为蛋白沉淀不完全吗?
9楼2013-01-07 21:48:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 孙金钥 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +16 基诺咪客 2026-08-17 20/1000 2026-08-20 12:44 by 201120518022
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +16 Ldrop2023 2026-08-13 20/1000 2026-08-20 11:07 by xskun
[基金申请] 言之凿凿,8月21号(明天)放榜 +12 医学老男孩 2026-08-20 14/700 2026-08-20 10:53 by ran2233
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +4 yuleib84 2026-08-19 5/250 2026-08-19 19:52 by hhs666
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +10 wangze12014 2026-08-14 12/600 2026-08-19 16:56 by 苦难博士
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候开奖? +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
信息提示
请填处理意见