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小木木木虫

铜虫 (小有名气)

[求助] 求解蛋白酶测定过程中滴加碳酸钠后出现沉淀,附详细过程~~~

福林法测土壤蛋白酶,在加碳酸钠后出现白色浑浊,用力摇动沉淀消失,但会产生很多小气泡,同时颜色也不是很透明,但在680nm下还算能测得出来

下面是详细的过程:
取1.00克土壤(< 2 mm)于大试管内。加入1ml pH为8.0的Tris-HCl缓冲液。用0.5ml甲苯盖盖处理15min。再加入2ml 1%的酪素溶液,将混合物仔细摇匀,橡胶塞封口,置于37 ℃恒温箱放置24h。与此同时,作不加基质(用2毫升缓冲液代替)的对照。培养结束后,加入3ml三氯醋酸溶液,摇匀,待沉淀完全过滤,除去沉淀。吸取1ml滤液于试管内,稀释一定量后加入5ml 0.4M的Na2CO3溶液,1ml Folin- Ciocalteu试剂,定容到25ml,充分摇匀后于37℃恒温箱中培养15min,显色充分后在680nm下比色。




请教前辈们
谢啦
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李增强

新虫 (小有名气)

★ ★
zongyu_1986(金币+2): 感谢积极参与交流,欢迎常来农林版! 2011-11-26 10:42:55
我记得恒温水浴后好多了,基本没什么影响
2楼2011-11-19 16:30:47
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小木木木虫

铜虫 (小有名气)

★ ★
zongyu_1986(金币+2): 道理上是想通的,不过效果不知道如何。感谢积极参与交流,欢迎常来农林版! 2011-11-26 10:44:08
引用回帖:
2楼: Originally posted by 李增强 at 2011-11-19 16:30:47:
我记得恒温水浴后好多了,基本没什么影响

一定要水浴吗?
我用相同温度的培养箱培养替代水域可以吗
3楼2011-11-21 09:48:08
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李增强

新虫 (小有名气)

我也是用的恒温培养箱,但是我是半个小时
4楼2011-11-23 20:05:04
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