| 查看: 3716 | 回复: 3 | ||
[求助]
蛋白提取中的沉淀是什么？
|
|
目前在提取蛋白时出现了些问题，希望能得到大家的帮助。 我用的是ripa裂解液，加了蛋白酶抑制剂，将贴壁细胞刮下来，冰上继续裂解，期间vortex几次，最后12,000gx10min ;此时分别取上清和沉淀加入loading buffer煮沸5min，上样做WB。发现上清和沉淀中均有目的条带。现想咨询：离心后的沉淀是什么成分？（细胞核？碎片？还是不溶性蛋白）；如果是不溶性的蛋白加了loading buffer煮沸就可以电泳做WB了吗？如果我想检测全细胞的蛋白，不分可溶性和不溶性，应该怎么做呢？ |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有296人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有67人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- TCA/丙酮沉淀法提取牛肌肉总蛋白，总是缺失大分量蛋白的原因在哪呢？
已经有5人回复
- 双向，TCA丙酮沉淀提取的蛋白，裂解液是不是水化液一样啊 ？
已经有6人回复
- 柞蚕总RNA提取中，蛋白抽提不尽
已经有12人回复
- 为什么提取的DNA总是降解？
已经有41人回复
- 液质提取回收率的问题
已经有4人回复
- 提出来的植物蛋白怎么有点发黑啊，是什么原因呢
已经有6人回复
- 为什么水提取的多糖，脱蛋白脱干净后，最终乙醇80%浓度沉淀不下来，为什么？
已经有9人回复
- 【求助】体内血浆样品用乙腈沉淀蛋白后如何浓集？还能进行萃取么？
已经有5人回复
- 【求助/交流】大家讨论一下SDS在质粒提取中的作用吧
已经有5人回复
- 【求助/交流】【求助】考马斯亮蓝测蛋白出现絮状沉淀
已经有14人回复
- 【求助/交流】RNA提取问题求助
已经有10人回复
- 【求助】生物样品的前处理-沉淀蛋白质
已经有19人回复
2楼2012-02-26 19:57:32
xhjggl
木虫 (正式写手)
- 应助: 43 (小学生)
- 金币: 2889.3
- 散金: 150
- 红花: 7
- 帖子: 556
- 在线: 190.9小时
- 虫号: 95496
- 注册: 2005-10-04
- 性别: GG
- 专业: 蛋白质组学
3楼2012-02-26 23:53:32
hongqifei
木虫 (小有名气)
- 应助: 47 (小学生)
- 金币: 2412.9
- 红花: 4
- 帖子: 261
- 在线: 134.5小时
- 虫号: 582655
- 注册: 2008-07-25
- 性别: GG
- 专业: 人类遗传学
4楼2012-02-27 20:08:51
40