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lxx071217

铜虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白提取中的沉淀是什么？

目前在提取蛋白时出现了些问题，希望能得到大家的帮助。
我用的是ripa裂解液，加了蛋白酶抑制剂，将贴壁细胞刮下来，冰上继续裂解，期间vortex几次，最后12,000gx10min ;此时分别取上清和沉淀加入loading buffer煮沸5min，上样做WB。发现上清和沉淀中均有目的条带。现想咨询：离心后的沉淀是什么成分？（细胞核？碎片？还是不溶性蛋白）；如果是不溶性的蛋白加了loading buffer煮沸就可以电泳做WB了吗？如果我想检测全细胞的蛋白，不分可溶性和不溶性，应该怎么做呢？
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1楼 2012-02-26 19:45:01
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