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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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maqi

木虫 (正式写手)

[求助] 碱溶酸沉法浓缩蛋白,酸沉后为什么要复溶 再冷冻干燥?

本人新手,刚接触到蛋白质,有几个问题请教:
1:碱溶酸沉后,用双蒸水洗涤沉淀三次。这个用水洗是怎么洗?(我理解的是用双蒸水把沉淀搅匀,再用抽滤或离心去除水)
2:可以用抽滤或离心后的沉淀直接做冷冻干燥么?为什么要复溶呢?
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不患无位,患所以立;不患莫己知,求为可知也。
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wolfishor

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
sweety: 金币+1, 鼓励应助,欢迎关注食品版 2013-01-19 15:22:24
1.不知道你做的是哪种蛋白,水洗应该是洗去水溶性蛋白杂质。
2。抽滤后蛋白质是一团一团的,直接冻干,影响效果。我们以前是用弱的醋酸溶解成溶液,溶液拿去冻干。
以前跟着大婶做过胶原蛋白医疗器械,不知道你的蛋白是作什么用?
衣带渐宽终不悔,为伊消得人憔悴
2楼2013-01-18 10:01:23
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wuxiao549

禁虫 (著名写手)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

3楼2013-01-19 10:22:03
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sunnymen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

水洗当然是杂质,包括糖类、酸碱盐等。复溶是为了恢复蛋白的高级结构,让其恢复活性。个人觉得离心和抽滤都不好玩。上次抽滤弄得吐血,砂芯漏斗抽不动,普通的抽滤漏斗一抽滤纸就穿孔。溶液冻干的就看设备好不好,我那台冻干机效果不是很好,装50mL的液体要干燥两天才能成粉末。弄了三个月蛋白,现在是接近崩溃边缘,如果LZ有什么好的idea,记得告诉我一声
4楼2013-01-24 18:07:58
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傲娇

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

水洗三次是加水,让蛋白沉淀分散于水中,再进行离心去上清,这样的目的是去除一些离子。复溶就是重新让蛋白质溶解,除杂,冷冻干燥
5楼2013-04-13 23:41:05
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跑调的生活

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

水洗是肯定得水洗的,要不蛋白质的纯度达不到,可是复溶的时候应该把pH调到你碱溶时候的pH还是调至中性?我现在还没弄明白,正在尝试……
6楼2013-06-05 10:54:34
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hjcui

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

水洗之后,ph调到中性
7楼2013-06-13 23:09:05
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abcyeye1989

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

复溶时候加多少水呢,要搅拌均匀么?能测PH么
。。。。。。
8楼2013-08-08 21:09:15
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Enron

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by sunnymen at 2013-01-24 18:07:58
水洗当然是杂质,包括糖类、酸碱盐等。复溶是为了恢复蛋白的高级结构,让其恢复活性。个人觉得离心和抽滤都不好玩。上次抽滤弄得吐血,砂芯漏斗抽不动,普通的抽滤漏斗一抽滤纸就穿孔。溶液冻干的就看设备好不好,我 ...

我也是同样的问题,不知楼主解决没,可否指导下
9楼2013-11-19 14:54:24
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