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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 碱溶酸沉法浓缩蛋白，酸沉后为什么要复溶 再冷冻干燥？
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maqi

木虫 (正式写手)

[求助] 碱溶酸沉法浓缩蛋白，酸沉后为什么要复溶 再冷冻干燥？

本人新手，刚接触到蛋白质，有几个问题请教：
1：碱溶酸沉后，用双蒸水洗涤沉淀三次。这个用水洗是怎么洗？（我理解的是用双蒸水把沉淀搅匀，再用抽滤或离心去除水）
2：可以用抽滤或离心后的沉淀直接做冷冻干燥么？为什么要复溶呢？
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不患无位，患所以立；不患莫己知，求为可知也。
1楼2013-01-17 18:22:19
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wolfishor

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
sweety: 金币+1, 鼓励应助，欢迎关注食品版 2013-01-19 15:22:24
1.不知道你做的是哪种蛋白，水洗应该是洗去水溶性蛋白杂质。
2。抽滤后蛋白质是一团一团的，直接冻干，影响效果。我们以前是用弱的醋酸溶解成溶液，溶液拿去冻干。
以前跟着大婶做过胶原蛋白医疗器械，不知道你的蛋白是作什么用？
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衣带渐宽终不悔，为伊消得人憔悴
2楼2013-01-18 10:01:23
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wuxiao549

禁虫 (著名写手)
感谢参与，应助指数 +1
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3楼2013-01-19 10:22:03
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sunnymen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

水洗当然是杂质，包括糖类、酸碱盐等。复溶是为了恢复蛋白的高级结构，让其恢复活性。个人觉得离心和抽滤都不好玩。上次抽滤弄得吐血，砂芯漏斗抽不动，普通的抽滤漏斗一抽滤纸就穿孔。溶液冻干的就看设备好不好，我那台冻干机效果不是很好，装50mL的液体要干燥两天才能成粉末。弄了三个月蛋白，现在是接近崩溃边缘，如果LZ有什么好的idea，记得告诉我一声
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4楼2013-01-24 18:07:58
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傲娇

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

水洗三次是加水，让蛋白沉淀分散于水中，再进行离心去上清，这样的目的是去除一些离子。复溶就是重新让蛋白质溶解，除杂，冷冻干燥
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5楼2013-04-13 23:41:05
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跑调的生活

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

水洗是肯定得水洗的，要不蛋白质的纯度达不到，可是复溶的时候应该把pH调到你碱溶时候的pH还是调至中性？我现在还没弄明白，正在尝试……
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6楼2013-06-05 10:54:34
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hjcui

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

水洗之后，ph调到中性
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7楼2013-06-13 23:09:05
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abcyeye1989

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

复溶时候加多少水呢，要搅拌均匀么？能测PH么
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。。。。。。
8楼2013-08-08 21:09:15
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Enron

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sunnymen at 2013-01-24 18:07:58
水洗当然是杂质，包括糖类、酸碱盐等。复溶是为了恢复蛋白的高级结构，让其恢复活性。个人觉得离心和抽滤都不好玩。上次抽滤弄得吐血，砂芯漏斗抽不动，普通的抽滤漏斗一抽滤纸就穿孔。溶液冻干的就看设备好不好，我 ...

我也是同样的问题，不知楼主解决没，可否指导下
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9楼2013-11-19 14:54:24
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