24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 4559  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

huangxinqi20

铜虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白沉淀后不能复溶~!

想提取一株短小芽孢杆菌产生的活性蛋白,发酵液中加入硫酸铵使其沉淀,蛋白沉淀加入PBS不能溶解,然后在PBS中透析,透析完了蛋白还是不能复溶,呈胶体状,我试了加NaOH调节ph到12左右才可以使蛋白溶解。但又怕蛋白变性,想问问大家有没有其他办法使其溶解,不然不好上柱分离啊。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smisuccess

金虫 (小有名气)

引用回帖:
80285楼: Originally posted by huangxinqi20 at 2011-07-10 13:58:04:
想提取一株短小芽孢杆菌产生的活性蛋白,发酵液中加入硫酸铵使其沉淀,蛋白沉淀加入PBS不能溶解,然后在PBS中透析,透析完了蛋白还是不能复溶,呈胶体状,我试了加NaOH调节ph到12左右才可以使蛋白溶解。但又怕蛋白 ...

请问楼主你的蛋白最后溶解了吗,我现在也在做有关蛋白的,也遇到了跟你一样的情况?
5楼2012-04-26 16:01:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

★ ★
西瓜(金币+2): Good 2011-07-10 21:44:37
硫酸铵沉淀的梯度有没有摸索?不会早就失活了吧?
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2011-07-10 18:51:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangxinqi20

铜虫 (初入文坛)

dhd997: 把信息汇总在一楼吧。可以编辑的。 2011-07-11 07:48:44
做了梯度,30%以下没活性,30%-60%的沉淀检测有活性,所以应该没有失活。
3楼2011-07-10 23:25:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沧海飞雪

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我也是用的硫酸铵沉淀法,沉淀完了想过HPLC分离,但是不知道用什么溶剂能即复溶又适合过柱子!请问楼主的问题是怎么解决的?求帮助!
6楼2012-10-18 10:21:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 26年申博自荐-计算机视觉 20+3 光亮我自己 2026-05-01 4/200 2026-05-03 09:01 by lfy8008
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qs8kylt1wr 2026-05-01 4/200 2026-05-03 07:19 by jmr1kibhvw
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qs8kylt1wr 2026-05-01 4/200 2026-05-03 06:52 by jmr1kibhvw
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 d8tbypao1q 2026-05-01 3/150 2026-05-03 06:04 by jmr1kibhvw
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 d8tbypao1q 2026-05-01 3/150 2026-05-03 05:07 by jmr1kibhvw
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 d8tbypao1q 2026-05-01 4/200 2026-05-03 05:04 by jmr1kibhvw
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 d8tbypao1q 2026-05-01 4/200 2026-05-03 04:19 by w5idbsc3mz
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 d8tbypao1q 2026-05-01 4/200 2026-05-03 03:49 by w5idbsc3mz
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 k17zww5nna 2026-05-01 4/200 2026-05-03 03:19 by w5idbsc3mz
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 k17zww5nna 2026-05-01 4/200 2026-05-03 03:04 by w5idbsc3mz
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 k17zww5nna 2026-05-01 4/200 2026-05-03 02:06 by w5idbsc3mz
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 k17zww5nna 2026-05-01 5/250 2026-05-03 01:49 by w5idbsc3mz
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 k17zww5nna 2026-05-01 4/200 2026-05-03 01:34 by w5idbsc3mz
[考博] 考博 +4 Eternitf 2026-04-29 4/200 2026-05-02 16:10 by yejenny
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qs8kylt1wr 2026-05-01 3/150 2026-05-02 15:51 by zahslv263y
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 d8tbypao1q 2026-05-01 3/150 2026-05-02 14:21 by zahslv263y
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 d8tbypao1q 2026-05-01 3/150 2026-05-02 14:06 by zahslv263y
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 k17zww5nna 2026-05-01 3/150 2026-05-02 09:36 by dz7y1p1i98
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 k17zww5nna 2026-05-01 5/250 2026-05-02 09:21 by dz7y1p1i98
[基金申请] 收到国自然专家邀请后几年才会有本子送过来评 +3 barley5 2026-04-30 3/150 2026-04-30 14:58 by aspect3000
信息提示
请填处理意见