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小新3858

木虫 (正式写手)

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[求助] 冷乙醇沉淀蛋白原理，如何操作

有没有做过冷乙醇沉淀浓缩蛋白的虫虫，大家交流下，沉淀原理是什么，该如何操作

[ Last edited by 小新3858 on 2013-1-6 at 13:51 ]

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1楼2013-01-06 13:49:21

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xmchh

金虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

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小新3858: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢 2013-01-06 15:19:38
amisking: 回帖置顶 2013-01-06 19:50:34

1.蛋白质含量，愈高，共沉多；反之，分离愈彻底。当然有度。溶液太稀了，成本高。2。离子强度：这与介电强度有关。3。溶液pH值：调到目标蛋白等电点周围。4。乙醇浓度：一般来说乙醇浓度多少，与目标蛋白的分子量有关：比如8%，可沉淀纤维蛋白原，20%可沉淀球蛋白，40%可沉淀白蛋白等等，当然，乙醇浓度与溶液pH值配合使用。加入乙醇不能过快，防止局部过浓。要边加边摇动。否则，共沉多！或者局部变性。5。溶液温度：必须低温，乙醇反应是个放热反应，如果温度高，可引起蛋白质变性，不可逆的变形。这五变参数，要综合，动态的调整，可达到精确分离蛋白质的作用。