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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于糖原、乙酸钠、乙醇沉淀核酸的问题
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sai00fuji

金虫 (正式写手)

[求助] 关于糖原、乙酸钠、乙醇沉淀核酸的问题

用糖原，乙酸钠，乙醇，沉淀DNA。

在含有DNA的溶液里加入以下试剂：

1//10 VOL 乙酸钠

2.5 VOL 95乙醇

1.3 ul 糖原

结果立即出现白色絮状沉淀。我是先加乙醇，再加糖原，最后加乙酸钠。在加入糖原之后，就出现了白色沉淀。

google了一下，糖原不溶于乙醇，是核酸助沉剂。但是以前做的时候貌似没出现这个情况啊，难道是因为以前做的时候是最后加的乙醇？



到底正不正常啊？

谢谢大家~
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1楼 2011-08-11 18:09:28
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sai00fuji

金虫 (正式写手)
★ ★
adslye(金币+2): 感谢你的经验，常发帖哦~~祝顺利！ 2011-08-12 09:46:37
美国那边的客服说是因为加样顺序，应该先把乙酸钠和糖原什么混匀再加乙醇就ok了，经验之谈
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2楼2011-08-12 09:14:59
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adslye

银虫 (正式写手)
这个问题我也想知道，只不过我的是多糖，不想要它。
但我发现高盐除多糖，似乎也存在这个现象。多糖析出后再溶解很困难。
想深入的了解下。
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3楼2011-08-12 09:45:58
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sai00fuji

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by adslye at 2011-08-12 09:45:58:
这个问题我也想知道，只不过我的是多糖，不想要它。
但我发现高盐除多糖，似乎也存在这个现象。多糖析出后再溶解很困难。
想深入的了解下。

我提取rna的时候样品里有多糖，就是用的1/2异丙醇+1/2高盐溶液做的rna沉降，效果还行，条带挺锐利的。当时室温放置10min没有沉淀，我就放-20了，结果溶液有一部分估计是盐溶液就结冰了，有机相还是溶液状态，所以可能还是放在冰水浴里比较好吧，那次结果还行就没有继续试。

美国那边说的是因为乙酸钠和糖原要先结合，如果先加乙醇的话，糖原就直接析出了。所以你试试先加盐再加糖原再加乙醇的方法吧。
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4楼2011-08-12 14:45:26
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adslye

银虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sai00fuji at 2011-08-12 14:45:26:
我提取rna的时候样品里有多糖，就是用的1/2异丙醇+1/2高盐溶液做的rna沉降，效果还行，条带挺锐利的。当时室温放置10min没有沉淀，我就放-20了，结果溶液有一部分估计是盐溶液就结冰了，有机相还是溶液状态，所以 ...

恩，非常感谢！
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5楼2011-08-13 09:05:57
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zdpdsg

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sai00fuji at 2011-08-12 14:45:26
我提取rna的时候样品里有多糖，就是用的1/2异丙醇+1/2高盐溶液做的rna沉降，效果还行，条带挺锐利的。当时室温放置10min没有沉淀，我就放-20了，结果溶液有一部分估计是盐溶液就结冰了，有机相还是溶液状态，所以可 ...

1/2的高盐溶液是什么配方？万分感谢
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6楼2019-11-29 19:45:34
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