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终朝采露

新虫 (初入文坛)

[求助] 透析后蛋白有沉淀 已有1人参与

最近在做盐析法提抗体蛋白,45%沉淀后用pbs 2ml溶解,透析液为该pbs(20mMpb,0.9%NaCl),透析于4℃过夜,第二天一看,有大量絮状沉淀,后离心上电泳,该沉淀为目的蛋白。我看了很多透析的帖,也都不太符合我这种情况,我的ph,温度,离子浓度,好像都变化不大啊,怎么也有沉淀? 请教各位老师帮忙解答了,并谢!
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青春是一本太仓促的书;
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lpzl

木虫 (正式写手)

同求。。。
Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
2楼2013-12-20 15:02:25
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lwq_0123

银虫 (初入文坛)

我的也是啊
3楼2013-12-26 17:11:54
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zilinweizhu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-01-29 16:30:42
透析蛋白浓度太大了,可以降低透析浓度,另外听说加入精氨酸可以减少蛋白沉淀,但我自己没有试过,另外PBS中可以加入少量甘油,具体做什么我也没有研究过,就是实验室告诉我可以加,我就加了。还有就是透析时不要一步到位,要逐渐降低透析液中盐离子浓度,多换几次透析液,一步到位容易造成沉淀。
4楼2013-12-26 17:30:54
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