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终朝采露

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 17.3
帖子: 22
在线: 23.5小时
虫号: 1234070
注册: 2011-03-15
性别: GG
专业: 免疫生物学

[求助] 透析后蛋白有沉淀已有1人参与

最近在做盐析法提抗体蛋白，45%沉淀后用pbs 2ml溶解，透析液为该pbs（20mMpb，0.9%NaCl），透析于4℃过夜，第二天一看，有大量絮状沉淀，后离心上电泳，该沉淀为目的蛋白。我看了很多透析的帖，也都不太符合我这种情况，我的ph，温度，离子浓度，好像都变化不大啊，怎么也有沉淀？请教各位老师帮忙解答了，并谢！

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青春是一本太仓促的书；

1楼 2013-12-20 11:17:30

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lwq_0123

银虫 (初入文坛)

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虫号: 2766765
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专业: 中国古代史

我的也是啊

3楼2013-12-26 17:11:54

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zilinweizhu

银虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-01-29 16:30:42

透析蛋白浓度太大了，可以降低透析浓度，另外听说加入精氨酸可以减少蛋白沉淀，但我自己没有试过，另外PBS中可以加入少量甘油，具体做什么我也没有研究过，就是实验室告诉我可以加，我就加了。还有就是透析时不要一步到位，要逐渐降低透析液中盐离子浓度，多换几次透析液，一步到位容易造成沉淀。

赞一下(1人)

4楼2013-12-26 17:30:54

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