应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白保存 冻融后沉淀
121/2返回列表12下一页
查看: 5826  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

nsfzlc

铜虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白保存 冻融后沉淀

我的蛋白在经过Ni柱纯化后，超滤浓缩后，直接放在-20保存，后来再取出过分子筛时，放在冰上，或者室温解冻，都会有不少沉淀析出？是蛋白变性了吧？该怎么避免呢？总不能每次纯化都不睡觉连续作业吧。。。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-01-21 14:36:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

mlanqiang

木虫之王 (文学泰斗)

蓝博士

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
液氮冻后放-80°C应该问题不大了。
赞一下(1人) 回复此楼
蓝精灵
4楼2013-01-22 08:22:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果只是过夜的话放在4°C。长时间液氮冻后放-80°C。你的样品里加了甘油吗？
赞一下 回复此楼
2楼2013-01-21 15:55:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-01-22 12:04:59
本帖仅楼主可见
赞一下
3楼2013-01-22 05:46:32
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

yongbo_liang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1.你蛋白在Ni柱纯化，其含有一定浓度的咪唑，对蛋白有影响，建议纯化后直接进行除盐，保存蛋白。
2.对于你的蛋白样品最好进行稳定性研究，冻融后出现沉淀可能和你样品的稳定性有关。
赞一下 回复此楼
5楼2013-01-22 09:55:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Rachel1129

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
也有可能是你在纯化蛋白的过程中没有严格在冰上操作或者纯化时间过长，导致蛋白变性。
赞一下 回复此楼
6楼2013-01-22 10:33:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

runying36

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该是没复性好或者是变性蛋白。上柱前离心去除，不能让堵柱子
赞一下 回复此楼
7楼2013-01-22 11:04:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhang881007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
什么蛋白？我们一般做蛋白时，都不冰冻！在冷冻条件下下，蛋白的周边固定结合水会变，再化冬后会引起引起蛋白沉淀！！！如果短时间，你可以放4C保存。时间长了，可以试试冻干，不过冻干后，有些蛋白的溶解性会降低。具体的看你的蛋白而定。
赞一下 回复此楼
shine
8楼2013-01-22 15:39:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

30937747

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我的好像也是诶，析出来以后就溶不掉了。
赞一下 回复此楼
我依旧会努力.
9楼2013-01-24 09:38:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kedaxiaoyu

木虫 (职业作家)

神虫浮云

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这种情况我遇到过，超滤浓缩不知道你顺便置换Buffer了没有，不置换Buffer,浓缩后样品浓度变大咪唑对蛋白的影响应该更大。还有一种情况就是你的蛋白在浓缩后的缓冲液中不稳定，尝试改变缓冲液的PH值，沉淀现象可能消失。我遇到的情况一开始和你说的一样，有时洗脱下来后都有分层，后来将洗脱液的PH调到8后-20保存，解冻后基本上就没什么沉淀了。
赞一下 回复此楼
10楼2013-01-24 11:01:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 nsfzlc 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 cqwQDCxMcL3I 2026-09-29 4/200 2026-09-30 13:35 by C3vABopYbZJS
[教师之家] 某top大学教授说“能够在市场中兑现的能力才是真能力”无比同意！ +10 zju2000 2026-09-26 13/650 2026-09-30 10:26 by yexuqing
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:47 by yCO1Ll7aHtsw
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:37 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:30 by etmYJ6d2rquH
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:03 by etmYJ6d2rquH
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 15:46 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:58 by etmYJ6d2rquH
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:41 by etmYJ6d2rquH
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:30 by etmYJ6d2rquH
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:24 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 7/350 2026-09-29 14:07 by etmYJ6d2rquH
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 09:59 by JzYBbHIXWSrW
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:42 by ZvyPK8n6Nfki
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:28 by ZvyPK8n6Nfki
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:46 by b8fCuTHqckEt
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-28 19:08 by 9lS3ad5oOymn
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 18:51 by 9lS3ad5oOymn
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭