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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】求助免疫球蛋白纯化后有沉淀的事情！
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anmt

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】求助免疫球蛋白纯化后有沉淀的事情！ 已有3人参与

大家好，我们是专门生产小鼠抗人CD系列免疫球蛋白的，抗体纯化后都保存在PH7.0的PBS中，有的抗体出现沉淀，致使纯化出的抗体量减少。我们考虑可能是和保存液的PH，离子强度等等有关，希望大家能告诉我一些关于这个问题的答案，我也想做这方面的实验摸索，但是查资料却很少关于保存液的。
再有就是沉淀是不是和蛋白的等电点有关系啊，如何测定蛋白质的等电点呢，希望大家指教！
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1楼 2010-07-16 14:54:13
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+1):谢谢交流 2010-07-16 18:03:16
蛋白沉淀和离子浓度，ph，蛋白自身性质等都有关系。如果你们使用的量比较大，可以纯化后冻干保存。
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52187644
2楼2010-07-16 15:58:55
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anmt

银虫 (小有名气)
有关于这方面的资料吗，比如怎么样才能减少蛋白的沉淀，多谢了
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3楼2010-07-16 16:02:19
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lwiaanngg

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-07-17 05:06:37
无法告诉你准确答案。你的case，pH和离子强度都可能有影响。
对于离子，一般出现的问题是salt out。还有，pH7的buffer有很多，不仅仅有PBS，你可以试试其它的，例如HEPES。
等电点一般不相信软件的结果，还是用isoelectric focus去跑专门的胶看了
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4楼2010-07-17 00:51:18
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