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zsm0507

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】纯化后的蛋白浓缩后形成大量沉淀已有3人参与

纯化后的蛋白浓缩后形成大量沉淀,用蔗糖浓缩的,不知道如何是好?顺便问下,纯化后的蛋白多少浓度范围最适合保存,使蛋白既不容易降解,也不容易形成沉淀?
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献


dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-10-25 08:14:36
zsm0507(金币+2): 2010-11-23 10:24:07
每个蛋白都是一个个例,不能像你这样说。看你后续是做什么实验了,有的蛋白要到70mg/mL才能长晶体,要是做功能的话,则浓度要低得太多了。

而且你问的问题太笼统了。。。。。
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2010-10-22 16:53:28
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zsm0507

金虫 (小有名气)

dhd997:建议引用回复,方便虫友交流。 2010-10-25 08:15:02
我后续要做Elisa
3楼2010-10-25 08:12:38
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geminiww

木虫 (职业作家)

猪家族~~哑巴猪

借楼主的帖子问一下,楼主用的是什么方法浓缩的蛋白?
爱生活。。
4楼2010-10-25 08:40:11
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sqhnsd

金虫 (正式写手)

zsm0507(金币+2): 2010-11-23 10:24:31
引用回帖:
Originally posted by zsm0507 at 2010-10-22 16:26:12:
纯化后的蛋白浓缩后形成大量沉淀,用蔗糖浓缩的,不知道如何是好?顺便问下,纯化后的蛋白多少浓度范围最适合保存,使蛋白既不容易降解,也不容易形成沉淀?

哈哈,ELISA的蛋白需要的浓度很低啊,所以不需要蛋白浓度太浓0.5mg/ml就可以了,一般长期保存建议1mg/ml,保存在30%-50%甘油中。
5楼2010-10-25 09:51:10
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zsm0507

金虫 (小有名气)

我是用蔗糖浓缩蛋白的
6楼2010-10-27 16:04:31
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

zsm0507(金币+1): 2010-11-23 10:24:40
为了减少引入的杂志及缓冲液成分的变化,我们纯化后的蛋白都是超滤浓缩的。
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
7楼2010-10-27 16:17:01
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王会征

铁杆木虫 (著名写手)


dhd997(金币+1):鼓励交流。 2010-10-29 14:23:28
做Elisa不用浓缩就可以啊
8楼2010-10-27 20:48:17
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zsm0507

金虫 (小有名气)

浓缩之后是为了脱盐呀
9楼2010-10-29 13:00:08
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foryever

木虫 (文坛精英)

假装忧伤的枯木桩

zsm0507(金币+3): 2010-11-23 10:25:12
我们也是用超滤的方法浓缩的…蛋白的最佳保存浓度可以自己在浓缩过程中自己摸索…或者浓缩之后立即冻干就无所谓降解或沉淀了…再一个,保存浓度是多少与降解不降解应该没什么关系吧…
         ♨物是人非事事休,欲语泪先流♨
10楼2010-10-29 14:36:54
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