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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】纯化后的蛋白浓缩后形成大量沉淀
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zsm0507

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】纯化后的蛋白浓缩后形成大量沉淀 已有3人参与

纯化后的蛋白浓缩后形成大量沉淀，用蔗糖浓缩的，不知道如何是好？顺便问下，纯化后的蛋白多少浓度范围最适合保存，使蛋白既不容易降解，也不容易形成沉淀？
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1楼 2010-10-22 16:26:12
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-10-25 08:14:36
zsm0507(金币+2): 2010-11-23 10:24:07
每个蛋白都是一个个例，不能像你这样说。看你后续是做什么实验了，有的蛋白要到70mg/mL才能长晶体，要是做功能的话，则浓度要低得太多了。

而且你问的问题太笼统了。。。。。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2010-10-22 16:53:28
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zsm0507

金虫 (小有名气)
dhd997:建议引用回复，方便虫友交流。 2010-10-25 08:15:02
我后续要做Elisa
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3楼2010-10-25 08:12:38
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geminiww

木虫 (职业作家)

猪家族~~哑巴猪
借楼主的帖子问一下，楼主用的是什么方法浓缩的蛋白？
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爱生活。。
4楼2010-10-25 08:40:11
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sqhnsd

金虫 (正式写手)
zsm0507(金币+2): 2010-11-23 10:24:31
引用回帖:
Originally posted by zsm0507 at 2010-10-22 16:26:12:
纯化后的蛋白浓缩后形成大量沉淀，用蔗糖浓缩的，不知道如何是好？顺便问下，纯化后的蛋白多少浓度范围最适合保存，使蛋白既不容易降解，也不容易形成沉淀？

哈哈，ELISA的蛋白需要的浓度很低啊，所以不需要蛋白浓度太浓0.5mg/ml就可以了，一般长期保存建议1mg/ml，保存在30%-50%甘油中。
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5楼2010-10-25 09:51:10
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zsm0507

金虫 (小有名气)
我是用蔗糖浓缩蛋白的
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6楼2010-10-27 16:04:31
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
zsm0507(金币+1): 2010-11-23 10:24:40
为了减少引入的杂志及缓冲液成分的变化，我们纯化后的蛋白都是超滤浓缩的。
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7楼2010-10-27 16:17:01
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王会征

铁杆木虫 (著名写手)
★
dhd997(金币+1):鼓励交流。 2010-10-29 14:23:28
做Elisa不用浓缩就可以啊
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8楼2010-10-27 20:48:17
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zsm0507

金虫 (小有名气)
浓缩之后是为了脱盐呀
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9楼2010-10-29 13:00:08
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foryever

木虫 (文坛精英)

假装忧伤的枯木桩
zsm0507(金币+3): 2010-11-23 10:25:12
我们也是用超滤的方法浓缩的…蛋白的最佳保存浓度可以自己在浓缩过程中自己摸索…或者浓缩之后立即冻干就无所谓降解或沉淀了…再一个，保存浓度是多少与降解不降解应该没什么关系吧…
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　　　　　　　　　♨物是人非事事休，欲语泪先流♨
10楼2010-10-29 14:36:54
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