应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】为何我的蛋白纯化出来后有三条带？
211/3返回列表123下一页
查看: 2582  |  回复: 20
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zhshch2009

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】为何我的蛋白纯化出来后有三条带？

请问各位做过蛋白纯化的同仁：我纯化的蛋白为何洗脱出来的是三条带？应该是100KD左右的一条才对，这是什么原因？难道是被打断了？另外这三条带都比100KD小～而加起来的总和又不100KD大

[ Last edited by zhshch2009 on 2010-9-2 at 10:21 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-09-02 10:00:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhshch2009

铁虫 (小有名气)
另外这三条带都比100KD小～
赞一下 回复此楼
2楼2010-09-02 10:15:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yaojc

木虫 (正式写手)
zhshch2009(金币+1): 2010-09-02 10:29:35
是不是分解了，你是电泳检测的吗？

[ Last edited by yaojc on 2010-9-2 at 10:19 ]
赞一下 回复此楼
专注、专心、专业
3楼2010-09-02 10:17:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhshch2009

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yaojc at 2010-09-02 10:17:28:
是不是分解了，你是电泳检测的吗？

[ Last edited by yaojc on 2010-9-2 at 10:19 ]

对的，跑的SDS-PGAE,可是我不明白如果分解了的话为什么三条带加起来大小不等于应有大小呢？
赞一下 回复此楼
4楼2010-09-02 10:29:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蓝皮鼠7983

至尊木虫 (文坛精英)

飞过蓝天
zhshch2009(金币+1): 2010-09-02 10:41:33
应该是分解了
回复此楼
海到尽头天做岸，山登绝顶我为峰。
5楼2010-09-02 10:32:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhshch2009

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 蓝皮鼠7983 at 2010-09-02 10:32:14:
应该是分解了

问题如上，为什么分解了之后的条带大小加起来不等于应有大小？SDS-PAGE加巯基乙醇会不会断键而分解蛋白？
赞一下 回复此楼
6楼2010-09-02 10:40:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yaojc

木虫 (正式写手)
★
amisking(金币+1):鼓励新虫！ 2010-09-02 20:44:44
如果是巯基乙醇分解，那么你的蛋白有多个二硫键，断裂后加起来肯定不是原来大小，一定要大的。
巯基乙醇会导致二硫键断裂，重新跑电泳，样本处理时不加巯基乙醇看下！

[ Last edited by yaojc on 2010-9-2 at 10:58 ]
赞一下(1人) 回复此楼
专注、专心、专业
7楼2010-09-02 10:57:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhshch2009

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yaojc at 2010-09-02 10:57:08:
如果是巯基乙醇分解，那么你的蛋白有多个二硫键，断裂后加起来肯定不是原来大小，一定要大的。
巯基乙醇会导致二硫键断裂，重新跑电泳，样本处理时不加巯基乙醇看下！

[ Last edited by yaojc on 2010-9-2 a ...

但是它是我自己构建菌株表达的蛋白，也有可能形成二硫键吗？恩！我试试！

[ Last edited by zhshch2009 on 2010-9-2 at 11:30 ]
赞一下 回复此楼
8楼2010-09-02 11:20:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wchuangqi

铜虫 (小有名气)
zhshch2009(金币+1): 2010-09-02 13:20:36
我觉得是降解的可能性比较大，加入蛋白酶抑制剂试试
赞一下 回复此楼
天道酬勤
9楼2010-09-02 11:30:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhshch2009

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by wchuangqi at 2010-09-02 11:30:44:
我觉得是降解的可能性比较大，加入蛋白酶抑制剂试试

好的，谢谢！
回复此楼
10楼2010-09-02 13:20:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhshch2009 的主题更新
211/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 明天应该可查了！？ +5 chengyan1220 2026-08-23 5/250 2026-08-24 23:28 by 我4大白菜
[论文投稿] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 3/150 2026-08-24 21:59 by BZKMTicpDhFj
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 5/250 2026-08-24 21:51 by BZKMTicpDhFj
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +21 koalala 2026-08-24 24/1200 2026-08-24 19:25 by 家与远方
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +14 ziyangfang 2026-08-19 17/850 2026-08-24 18:37 by 哈哈蛤？
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 21/1050 2026-08-24 14:21 by refreshing11
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +6 炎黄贵胄 2026-08-22 7/350 2026-08-24 11:58 by 6543yes
[基金申请] 朋友圈看到的 +7 wangzilk 2026-08-18 9/450 2026-08-24 10:50 by cmrandy
[基金申请] 什么时候开奖？ +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[基金申请] 今天放榜吗？ +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭