应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】为何我的蛋白纯化出来后有三条带？
211/3返回列表123下一页
查看: 2213  |  回复: 20
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zhshch2009

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】为何我的蛋白纯化出来后有三条带？

请问各位做过蛋白纯化的同仁：我纯化的蛋白为何洗脱出来的是三条带？应该是100KD左右的一条才对，这是什么原因？难道是被打断了？另外这三条带都比100KD小～而加起来的总和又不100KD大

[ Last edited by zhshch2009 on 2010-9-2 at 10:21 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-09-02 10:00:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhshch2009

铁虫 (小有名气)
另外这三条带都比100KD小～
赞一下 回复此楼
2楼2010-09-02 10:15:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yaojc

木虫 (正式写手)
zhshch2009(金币+1): 2010-09-02 10:29:35
是不是分解了，你是电泳检测的吗？

[ Last edited by yaojc on 2010-9-2 at 10:19 ]
赞一下 回复此楼
专注、专心、专业
3楼2010-09-02 10:17:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhshch2009

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yaojc at 2010-09-02 10:17:28:
是不是分解了，你是电泳检测的吗？

[ Last edited by yaojc on 2010-9-2 at 10:19 ]

对的，跑的SDS-PGAE,可是我不明白如果分解了的话为什么三条带加起来大小不等于应有大小呢？
赞一下 回复此楼
4楼2010-09-02 10:29:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蓝皮鼠7983

至尊木虫 (文坛精英)

飞过蓝天
zhshch2009(金币+1): 2010-09-02 10:41:33
应该是分解了
回复此楼
海到尽头天做岸，山登绝顶我为峰。
5楼2010-09-02 10:32:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhshch2009

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 蓝皮鼠7983 at 2010-09-02 10:32:14:
应该是分解了

问题如上，为什么分解了之后的条带大小加起来不等于应有大小？SDS-PAGE加巯基乙醇会不会断键而分解蛋白？
赞一下 回复此楼
6楼2010-09-02 10:40:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yaojc

木虫 (正式写手)
★
amisking(金币+1):鼓励新虫！ 2010-09-02 20:44:44
如果是巯基乙醇分解，那么你的蛋白有多个二硫键，断裂后加起来肯定不是原来大小，一定要大的。
巯基乙醇会导致二硫键断裂，重新跑电泳，样本处理时不加巯基乙醇看下！

[ Last edited by yaojc on 2010-9-2 at 10:58 ]
赞一下(1人) 回复此楼
专注、专心、专业
7楼2010-09-02 10:57:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhshch2009

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yaojc at 2010-09-02 10:57:08:
如果是巯基乙醇分解，那么你的蛋白有多个二硫键，断裂后加起来肯定不是原来大小，一定要大的。
巯基乙醇会导致二硫键断裂，重新跑电泳，样本处理时不加巯基乙醇看下！

[ Last edited by yaojc on 2010-9-2 a ...

但是它是我自己构建菌株表达的蛋白，也有可能形成二硫键吗？恩！我试试！

[ Last edited by zhshch2009 on 2010-9-2 at 11:30 ]
赞一下 回复此楼
8楼2010-09-02 11:20:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wchuangqi

铜虫 (小有名气)
zhshch2009(金币+1): 2010-09-02 13:20:36
我觉得是降解的可能性比较大，加入蛋白酶抑制剂试试
赞一下 回复此楼
天道酬勤
9楼2010-09-02 11:30:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhshch2009

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by wchuangqi at 2010-09-02 11:30:44:
我觉得是降解的可能性比较大，加入蛋白酶抑制剂试试

好的，谢谢！
回复此楼
10楼2010-09-02 13:20:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhshch2009 的主题更新
211/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 5lbyq5wrhb 2026-02-07 4/200 2026-02-08 08:47 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 5lbyq5wrhb 2026-02-07 4/200 2026-02-08 08:46 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 3rkserf6qr 2026-02-07 4/200 2026-02-08 08:27 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +5 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 08:12 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 08:07 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 08:06 by vs90ilomwc
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 07:52 by vs90ilomwc
[找工作] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 07:46 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:27 by vs90ilomwc
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:26 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:07 by vs90ilomwc
[硕博家园] 博士延得我，科研能力直往上蹿 +8 偏振片 2026-02-02 8/400 2026-02-08 06:52 by liyeqik
[教师之家] 有院领导为了换新车，用横向课题经费买了俩车 +7 瞬息宇宙 2026-02-04 7/350 2026-02-07 21:47 by tfang
[有机交流] 酰胺脱乙酰基 10+5 chibby 2026-02-03 12/600 2026-02-07 19:29 by 江东闲人
[基金申请] 同年申请2项不同项目，第1个项目里不写第2个项目的信息，可以吗 +4 hitsdu 2026-02-06 4/200 2026-02-07 13:07 by jurkat.1640
[基金申请] 有时候真觉得大城市人没有县城人甚至个体户幸福 +9 苏东坡二世 2026-02-04 10/500 2026-02-07 12:37 by 小毛球
[考博] 天津大学招2026.09的博士生，欢迎大家推荐交流（博导是本人） +4 a793625982 2026-02-05 5/250 2026-02-07 10:57 by a793625982
[公派出国] CSC & MSCA 博洛尼亚大学能源材料课题组博士/博士后招生｜MSCA经费充足、排名优 +4 雨念 2026-02-01 6/300 2026-02-06 23:32 by MelissaPon
[基金申请] 面上项目申报 +3 Tide man 2026-02-01 3/150 2026-02-05 22:56 by god_tian
[教师之家] 遇见不省心的家人很难过 +18 otani 2026-02-03 22/1100 2026-02-04 11:06 by tangmnt
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭