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【求助/交流】为何我的蛋白纯化出来后有三条带?
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zhshch2009
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[交流]
【求助/交流】为何我的蛋白纯化出来后有三条带?
请问各位做过蛋白纯化的同仁:我纯化的蛋白为何洗脱出来的是三条带?应该是100KD左右的一条才对,这是什么原因?难道是被打断了?另外这三条带都比100KD小~而加起来的总和又不100KD大
[
Last edited by zhshch2009 on 2010-9-2 at 10:21
]
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1楼
2010-09-02 10:00:43
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zhshch2009
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Originally posted by
yaojc
at 2010-09-02 10:57:08:
如果是巯基乙醇分解,那么你的蛋白有多个二硫键,断裂后加起来肯定不是原来大小,一定要大的。
巯基乙醇会导致二硫键断裂,重新跑电泳,样本处理时不加巯基乙醇看下!
[
Last edited by yaojc on 2010-9-2 a ...
但是它是我自己构建菌株表达的蛋白,也有可能形成二硫键吗?恩!我试试!
[
Last edited by zhshch2009 on 2010-9-2 at 11:30
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2010-09-02 11:20:39
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另外这三条带都比100KD小~
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2楼
2010-09-02 10:15:28
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zhshch2009(金币+1): 2010-09-02 10:29:35
是不是分解了,你是电泳检测的吗?
[
Last edited by yaojc on 2010-9-2 at 10:19
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Originally posted by
yaojc
at 2010-09-02 10:17:28:
是不是分解了,你是电泳检测的吗?
[
Last edited by yaojc on 2010-9-2 at 10:19
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对的,跑的SDS-PGAE,可是我不明白如果分解了的话为什么三条带加起来大小不等于应有大小呢?
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4楼
2010-09-02 10:29:23
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