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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白保存 冻融后沉淀
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nsfzlc

铜虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白保存 冻融后沉淀

我的蛋白在经过Ni柱纯化后，超滤浓缩后，直接放在-20保存，后来再取出过分子筛时，放在冰上，或者室温解冻，都会有不少沉淀析出？是蛋白变性了吧？该怎么避免呢？总不能每次纯化都不睡觉连续作业吧。。。
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1楼 2013-01-21 14:36:19
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匿名

用户注销 (正式写手)
★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-01-22 12:04:59
本帖仅楼主可见
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3楼2013-01-22 05:46:32
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果只是过夜的话放在4°C。长时间液氮冻后放-80°C。你的样品里加了甘油吗？
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2楼2013-01-21 15:55:26
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mlanqiang

木虫之王 (文学泰斗)

蓝博士

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
液氮冻后放-80°C应该问题不大了。
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蓝精灵
4楼2013-01-22 08:22:19
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yongbo_liang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1.你蛋白在Ni柱纯化，其含有一定浓度的咪唑，对蛋白有影响，建议纯化后直接进行除盐，保存蛋白。
2.对于你的蛋白样品最好进行稳定性研究，冻融后出现沉淀可能和你样品的稳定性有关。
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5楼2013-01-22 09:55:26
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