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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 碳水化合物 » 食用菌多糖透析时（去完蛋白之后的多糖），底部为什么会产生沉淀？
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铜虫 (初入文坛)

[求助] 食用菌多糖透析时（去完蛋白之后的多糖），底部为什么会产生沉淀？

食用菌多糖透析时（去完蛋白之后的多糖），底部为什么会产生沉淀？对多糖含量有影响么？求各位大神帮下忙！！！
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努力就有收获
1楼 2012-10-03 10:42:49
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sdlj_2009

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2012-10-11 08:00:35
树树8013: 食品EPI+1, 问题回答的具体耐心，发放食品EPI一枚。请继续关注食品板块相关问题。 2012-10-14 18:00:23
一般的透析袋截留分子量在1.4万，常用且便宜，其他截留型号可能贵些；国内食用菌多糖研究领域所涉及的多糖，分子量远大于这些：十万到几十万，因此损失是透析操作造成的，可以忽略截留孔径造成的损失。单糖的分子量是180，寡糖是指20个单糖的糖链，分子量约3600，截留量6000的几乎到寡糖研究领域了；脱色素有难有易，和您前面的步骤有关，有时有的色素在加热时会与大分子的糖、蛋白结合，糖与蛋白在一起加热也会起变色反应等等，这样透析有时会脱不尽色素，只好前面操作中提前注意；食用菌的子实体在提取时，常用热水提，因而水提液比菌体发酵法的水提液要深，我一般控制水提温度在50-60度，多提两次；醇沉时候，将乙醇往水提液中缓缓注入，耐心让多糖沉淀出来，这样包裹的色素杂质少；如果是水提液往乙醇中注入，开始阶段会立刻出沉淀，会大量夹带杂质，虽然两种方式获得的沉淀量是不同的，结合多糖含量考虑，两种方式获得的多糖是一致的，但第二种夹带杂质多，颜色会深。有的色素很顽固，很难出去，有人用双氧水氧化脱色，我不喜欢，因为多糖的抗氧化活性中，有一类抑制羟基自由基的，就是让多糖与双氧水作用，因此双氧水脱色可能会改变多糖的结构与某些活性；
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6楼2012-10-10 18:08:23
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xdz1978

至尊木虫 (文坛精英)

持之以恒！

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
蛋白质没除干净，或是糖与蛋白质形成的复合物沉淀了。对结果肯定有影响
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一身正气，两袖清风，三餐温饱，四大皆空！
2楼2012-10-03 16:42:36
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铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xdz1978 at 2012-10-03 16:42:36
蛋白质没除干净，或是糖与蛋白质形成的复合物沉淀了。对结果肯定有影响

那要是做体内试验，比如说小鼠，影响大不大？能避免产生这种沉淀吗？
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努力就有收获
3楼2012-10-04 15:39:25
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sdlj_2009

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2012-10-11 08:00:29
我也遇到过这种情况。由于当时除蛋白比较彻底，所以我的观点是：透析离去的小分子，如单糖，对多糖有助溶作用；一些分子量大的多糖水溶解性有限；办法是，析出的沉淀和袋内的溶液继续往下处理，浓缩后，加热可以复溶，冷去后并不很快就析出，可以就此进行后续试验。
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4楼2012-10-09 17:08:58
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铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sdlj_2009 at 2012-10-09 17:08:58
我也遇到过这种情况。由于当时除蛋白比较彻底，所以我的观点是：透析离去的小分子，如单糖，对多糖有助溶作用；一些分子量大的多糖水溶解性有限；办法是，析出的沉淀和袋内的溶液继续往下处理，浓缩后，加热可以复溶 ...

弱弱的问下，去蛋白的多糖透析时是不是多选用8000-14000的透析袋呀？色素的分子量大概在什么范围？用截留量6000的色素会不会除不好？因为8000-14000的透析袋得到的多糖太少，不符合理论的少
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努力就有收获
5楼2012-10-10 12:30:41
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铜虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by sdlj_2009 at 2012-10-10 18:08:23
一般的透析袋截留分子量在1.4万，常用且便宜，其他截留型号可能贵些；国内食用菌多糖研究领域所涉及的多糖，分子量远大于这些：十万到几十万，因此损失是透析操作造成的，可以忽略截留孔径造成的损失。单糖的分子量 ...

那我还是用8000-14000的透析袋吧，非常感谢，对我帮之很大
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7楼2012-10-11 08:21:45
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