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铜虫 (初入文坛)

[求助] 食用菌多糖透析时(去完蛋白之后的多糖),底部为什么会产生沉淀?

食用菌多糖透析时(去完蛋白之后的多糖),底部为什么会产生沉淀?对多糖含量有影响么?求各位大神帮下忙!!!
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xdz1978

至尊木虫 (文坛精英)

持之以恒!

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
蛋白质没除干净,或是糖与蛋白质形成的复合物沉淀了。对结果肯定有影响
一身正气,两袖清风,三餐温饱,四大皆空!
2楼2012-10-03 16:42:36
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铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xdz1978 at 2012-10-03 16:42:36
蛋白质没除干净,或是糖与蛋白质形成的复合物沉淀了。对结果肯定有影响

那要是做体内试验,比如说小鼠,影响大不大?能避免产生这种沉淀吗?
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3楼2012-10-04 15:39:25
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sdlj_2009

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2012-10-11 08:00:29
我也遇到过这种情况。由于当时除蛋白比较彻底,所以我的观点是:透析离去的小分子,如单糖,对多糖有助溶作用;一些分子量大的多糖水溶解性有限;办法是,析出的沉淀和袋内的溶液继续往下处理,浓缩后,加热可以复溶,冷去后并不很快就析出,可以就此进行后续试验。
4楼2012-10-09 17:08:58
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铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by sdlj_2009 at 2012-10-09 17:08:58
我也遇到过这种情况。由于当时除蛋白比较彻底,所以我的观点是:透析离去的小分子,如单糖,对多糖有助溶作用;一些分子量大的多糖水溶解性有限;办法是,析出的沉淀和袋内的溶液继续往下处理,浓缩后,加热可以复溶 ...

弱弱的问下,去蛋白的多糖透析时是不是多选用8000-14000的透析袋呀?色素的分子量大概在什么范围?用截留量6000的色素会不会除不好?因为8000-14000的透析袋得到的多糖太少,不符合理论的少
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5楼2012-10-10 12:30:41
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sdlj_2009

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2012-10-11 08:00:35
树树8013: 食品EPI+1, 问题回答的具体耐心,发放食品EPI一枚。请继续关注食品板块相关问题。 2012-10-14 18:00:23
一般的透析袋截留分子量在1.4万,常用且便宜,其他截留型号可能贵些;国内食用菌多糖研究领域所涉及的多糖,分子量远大于这些:十万到几十万,因此损失是透析操作造成的,可以忽略截留孔径造成的损失。单糖的分子量是180,寡糖是指20个单糖的糖链,分子量约3600,截留量6000的几乎到寡糖研究领域了;脱色素有难有易,和您前面的步骤有关,有时有的色素在加热时会与大分子的糖、蛋白结合,糖与蛋白在一起加热也会起变色反应等等,这样透析有时会脱不尽色素,只好前面操作中提前注意;食用菌的子实体在提取时,常用热水提,因而水提液比菌体发酵法的水提液要深,我一般控制水提温度在50-60度,多提两次;醇沉时候,将乙醇往水提液中缓缓注入,耐心让多糖沉淀出来,这样包裹的色素杂质少;如果是水提液往乙醇中注入,开始阶段会立刻出沉淀,会大量夹带杂质,虽然两种方式获得的沉淀量是不同的,结合多糖含量考虑,两种方式获得的多糖是一致的,但第二种夹带杂质多,颜色会深。有的色素很顽固,很难出去,有人用双氧水氧化脱色,我不喜欢,因为多糖的抗氧化活性中,有一类抑制羟基自由基的,就是让多糖与双氧水作用,因此双氧水脱色可能会改变多糖的结构与某些活性;

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6楼2012-10-10 18:08:23
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铜虫 (初入文坛)

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引用回帖:
6楼: Originally posted by sdlj_2009 at 2012-10-10 18:08:23
一般的透析袋截留分子量在1.4万,常用且便宜,其他截留型号可能贵些;国内食用菌多糖研究领域所涉及的多糖,分子量远大于这些:十万到几十万,因此损失是透析操作造成的,可以忽略截留孔径造成的损失。单糖的分子量 ...

那我还是用8000-14000的透析袋吧,非常感谢,对我帮之很大
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7楼2012-10-11 08:21:45
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