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1066479423

银虫 (小有名气)

[求助] 蛋白过镍柱纯化,在用咪唑洗脱后需要做透析,透析怎么做??? 已有3人参与

现在有含有6个his标签的蛋白,用镍柱做纯化。在用咪唑洗脱后,需要做透析,我想问一下,透析应该怎么做呢???需要什么设备装置???希望哪位大神指导一下,越详细越好,在下非常感谢。
在一篇文中看到,在做完透析后,又过了一个poly(rI.rC)-agarose,不知道这个poly(rI.rC)-agarose是什么东西???它有什么作用呢?
谢谢

[ Last edited by 1066479423 on 2013-9-2 at 16:23 ]
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RUI1990

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-09-03 21:04:17
gyesang: 回帖置顶 2013-09-03 21:04:27
是需要透析的,剪下合适长度的透析袋,蒸馏水低火煮10分钟,一端夹好,加入蛋白液,另一端也用夹子封好,放入盛有透析液的烧杯中。初始透析液不加入甘油,直接透析,后换加甘油的透析液,此时可加快速度,即使用磁力搅拌器。祝好运!
做自己
5楼2013-09-03 09:48:18
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pengpeng7196

银虫 (小有名气)

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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-09-04 21:15:18
我建议使用超滤浓缩管,不仅可以去除咪唑,还可以浓缩蛋白,一举两得,并且时间比透析来的快
不断丰富自己
9楼2013-09-04 09:40:56
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dehong1573

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-09-03 21:03:55
买个透析膜,用夹子夹住做成一个袋子,把你样品加在袋子里边,再把透析带架在烧杯里,烧杯你加你想置换的buffer
科学永无止境,只有合作共享才能更好地……
3楼2013-09-02 19:30:18
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普通回帖

yimingwang

金虫 (小有名气)

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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-09-02 18:29:24
不知道你做什么试验。不过咪唑洗脱一般不需要透析。如果细胞用尿素裂解,为了除去尿素做透析。不知道你做试验的目的是什么,如果只做些酶活试验,直接用就好了。
Let'sdoit.
2楼2013-09-02 17:39:28
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因为吃饭

银虫 (小有名气)

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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-09-03 21:04:03
烧杯、透析袋、夹子、磁力搅拌器,冰箱或者层析柜。一般透析24h以上。
烧杯里面加入透析缓冲液;透析袋在用之前煮下,然后一端用夹子固定,加入你要透析的样品,再用夹子封死两端,丢到烧杯即可。
辩证。
4楼2013-09-03 08:49:21
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929519755

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-09-03 21:04:39
看看生工生物的产品目录里面有透析设备,也有方法……
想你没话说
6楼2013-09-03 15:33:51
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2008101111

金虫 (正式写手)

学术江湖混子

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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-09-03 21:04:45
透析简单的很,只需买个透析袋,透析袋截留分子量小于目的蛋白,然后袋子两端扎口,把蛋白装进袋子里,放进缓冲液中4度透析24小时,可以中间更换缓冲液
自主创业者,捣腾生物试剂
7楼2013-09-03 20:21:32
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宁静2007

木虫 (正式写手)

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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-09-04 21:15:11
一般都有现成的透析管在离心机中离心就行了,如果没有,也就只能透析了
8楼2013-09-04 08:54:08
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yanfang2012

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

我用的也是超滤管,既能换液又能浓缩
believe yourself!
10楼2013-10-07 22:11:19
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