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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 天然生物材料 » 关于丝素蛋白透析
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xxxy12005

铁虫 (正式写手)

[求助] 关于丝素蛋白透析

各位大神，求助下，
我的丝素蛋白总是在透析的时候出现白色的沉淀物质，出现一点点就业算了，无语的是，整个透析袋其全部都变成白色的物质，从外表观察就像是——豆沙那种状态——不过是白色的，
透析方法：先用自来水透析两天，过后用蒸馏水透析一天。
出现问题：将蛋白的浓盐溶液（LiBr，9.3M）转移进入透析袋中，不过两个小时就开始出现这种情况
再进一步：如果用10%PEG浓缩的话，就会变成为有弹性的棒状物质，对于溶解之前，质量增加了将近300%，（20g变成76g）
实在是不知道怎么办，
这是我第一个实验，唉~
下边是PEG浓缩之后的东西，惨不忍睹，
求指导
关于丝素蛋白透析
IMG_20131202_091830390.jpg
不会是回复就有三十个金币吧，我一共也就300+的金币，第一次发帖，希望……

[ Last edited by xxxy12005 on 2013-12-5 at 09:03 ]
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1楼 2013-12-05 08:59:14
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

trent8115

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xxxy12005: 金币+5 2013-12-08 00:14:17
markar: 金币+1, 感谢回帖交流！ 2013-12-09 22:10:41
xxxy12005: 金币+5 2013-12-10 09:45:09
不要用自来水，因为丝素在酸性条件下不稳定，而且自来水含大量钙离子，导致沉淀

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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5楼2013-12-07 23:57:02
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aircraftvip

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
markar: 金币+1, 应助指数+1, 感谢回帖交流！ 2013-12-09 22:10:59
xxxy12005: 金币+5 2013-12-10 09:45:21
你应该考虑Milli-Q water
刚开始摸索实验应该用微量或小量操作，节省原材料啊
可以做个对照试验，自来水加EDTA
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格物致知，知行合一
8楼2013-12-09 17:43:03
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普通回帖

66悠嘻

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xxxy12005: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-12-05 14:02:02
红舟流星: 金币+1, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-12-05 22:32:54
xxxy12005: 金币+5 2013-12-10 09:45:00
丝素溶液怕剪切力，易析出，用自来水透析的时候，你的流速要控制，不要对着冲这样。一般透析去盐后会有部分沉淀，最好过滤后再去浓缩。还有注意透析时候温度不能高。
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心有多大，舞台就有多大
2楼2013-12-05 13:43:45
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xxxy12005

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 66悠嘻 at 2013-12-05 13:43:45
丝素溶液怕剪切力，易析出，用自来水透析的时候，你的流速要控制，不要对着冲这样。一般透析去盐后会有部分沉淀，最好过滤后再去浓缩。还有注意透析时候温度不能高。

问题是，我这边全部都是这个样子啊，不知还能不能转变过来？
还是这种情况没有什么影响呢？
据我观察，这个东西都成为豆沙类似的东西了，还能否过滤呢？
温度就是现在的室温13℃左右，
自来水过后，现在我正在用蒸馏水透析，还是那种情况，一直是白色的东东
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3楼2013-12-05 14:01:01
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xxxy12005

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 66悠嘻 at 2013-12-05 13:43:45
丝素溶液怕剪切力，易析出，用自来水透析的时候，你的流速要控制，不要对着冲这样。一般透析去盐后会有部分沉淀，最好过滤后再去浓缩。还有注意透析时候温度不能高。

你好，但是现在我又进行了一次透析，结果还是变白了，没有用水流直接冲，不知道到底怎么了
好困难
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4楼2013-12-06 09:42:07
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xxxy12005

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by trent8115 at 2013-12-07 23:57:02
不要用自来水，因为丝素在酸性条件下不稳定，而且自来水含大量钙离子，导致沉淀

多谢帮助，我再试试看，希望可以成功
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6楼2013-12-08 00:15:54
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12ypchen2

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
markar: 金币+1, 感谢回帖交流！ 2013-12-09 22:10:48
xxxy12005: 金币+5 2013-12-10 09:45:16
好奇怪，我做的时候没有遇到这样的情况，你再详细的检查一下的步骤、药品等是否出问题了
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唔要毕业，别拦我！
7楼2013-12-09 14:21:09
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xxxy12005

铁虫 (正式写手)
楼上的大神们，问题已解决，其余步骤没有变化，我稍稍改进的地方
一，原来我是经过加热干燥的，到105℃
二，在透析袋使用之前处理了，虽然是旧的，但是我还是按照第一次使用的方法加EDTA+碳酸氢钠处理了下
三，这次我直接使用蒸馏水透析了5h，然后使用蒸馏水，未发生变化，表示成功了
四，我把20%调低到10%和5%左右了
五，大家帮忙分析下，到底是哪个或者是那些原因
不胜感激！
最后，多谢大家的帮助，我已将最后二十金币分给楼上的四位了
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9楼2013-12-10 09:52:00
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dhu小笼包

新虫 (初入文坛)
我最近也在做这个，这是因为产生了凝胶。原因主要有两种：（1）透析温度较高，一般在4摄氏度透析；（2）溶解的SF太多，浓度太大。我这儿有篇讲丝素蛋白溶液稳定性的文章，可以给我发邮件，我再发给你，chengyang1128@126.com
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10楼2015-04-12 15:24:38
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