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xxxy12005

铁虫 (正式写手)

[求助] 关于丝素蛋白透析

各位大神,求助下,
我的丝素蛋白总是在透析的时候出现白色的沉淀物质,出现一点点就业算了,无语的是,整个透析袋其全部都变成白色的物质,从外表观察就像是——豆沙那种状态——不过是白色的,
透析方法:先用自来水透析两天,过后用蒸馏水透析一天。
出现问题:将蛋白的浓盐溶液(LiBr,9.3M)转移进入透析袋中,不过两个小时就开始出现这种情况
再进一步:如果用10%PEG浓缩的话,就会变成为有弹性的棒状物质,对于溶解之前,质量增加了将近300%,(20g变成76g)
实在是不知道怎么办,
这是我第一个实验,唉~
下边是PEG浓缩之后的东西,惨不忍睹,
求指导
关于丝素蛋白透析
IMG_20131202_091830390.jpg
不会是回复就有三十个金币吧,我一共也就300+的金币,第一次发帖,希望……

[ Last edited by xxxy12005 on 2013-12-5 at 09:03 ]
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trent8115

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xxxy12005: 金币+5 2013-12-08 00:14:17
markar: 金币+1, 感谢回帖交流! 2013-12-09 22:10:41
xxxy12005: 金币+5 2013-12-10 09:45:09
不要用自来水,因为丝素在酸性条件下不稳定,而且自来水含大量钙离子,导致沉淀

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
5楼2013-12-07 23:57:02
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aircraftvip

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
markar: 金币+1, 应助指数+1, 感谢回帖交流! 2013-12-09 22:10:59
xxxy12005: 金币+5 2013-12-10 09:45:21
你应该考虑Milli-Q water
刚开始摸索实验应该用微量或小量操作,节省原材料啊
可以做个对照试验,自来水加EDTA
格物致知,知行合一
8楼2013-12-09 17:43:03
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普通回帖

66悠嘻

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xxxy12005: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-12-05 14:02:02
红舟流星: 金币+1, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-12-05 22:32:54
xxxy12005: 金币+5 2013-12-10 09:45:00
丝素溶液怕剪切力,易析出,用自来水透析的时候,你的流速要控制,不要对着冲这样。一般透析去盐后会有部分沉淀,最好过滤后再去浓缩。还有注意透析时候温度不能高。
心有多大,舞台就有多大
2楼2013-12-05 13:43:45
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xxxy12005

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 66悠嘻 at 2013-12-05 13:43:45
丝素溶液怕剪切力,易析出,用自来水透析的时候,你的流速要控制,不要对着冲这样。一般透析去盐后会有部分沉淀,最好过滤后再去浓缩。还有注意透析时候温度不能高。

问题是,我这边全部都是这个样子啊,不知还能不能转变过来?
还是这种情况没有什么影响呢?
据我观察,这个东西都成为豆沙类似的东西了,还能否过滤呢?
温度就是现在的室温13℃左右,
自来水过后,现在我正在用蒸馏水透析,还是那种情况,一直是白色的东东
3楼2013-12-05 14:01:01
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xxxy12005

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 66悠嘻 at 2013-12-05 13:43:45
丝素溶液怕剪切力,易析出,用自来水透析的时候,你的流速要控制,不要对着冲这样。一般透析去盐后会有部分沉淀,最好过滤后再去浓缩。还有注意透析时候温度不能高。

你好,但是现在我又进行了一次透析,结果还是变白了,没有用水流直接冲,不知道到底怎么了
好困难
4楼2013-12-06 09:42:07
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xxxy12005

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by trent8115 at 2013-12-07 23:57:02
不要用自来水,因为丝素在酸性条件下不稳定,而且自来水含大量钙离子,导致沉淀

多谢帮助,我再试试看,希望可以成功
6楼2013-12-08 00:15:54
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12ypchen2

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
markar: 金币+1, 感谢回帖交流! 2013-12-09 22:10:48
xxxy12005: 金币+5 2013-12-10 09:45:16
好奇怪,我做的时候没有遇到这样的情况,你再详细的检查一下的步骤、药品等是否出问题了
唔要毕业,别拦我!
7楼2013-12-09 14:21:09
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xxxy12005

铁虫 (正式写手)

楼上的大神们,问题已解决,其余步骤没有变化,我稍稍改进的地方
一,原来我是经过加热干燥的,到105℃
二,在透析袋使用之前处理了,虽然是旧的,但是我还是按照第一次使用的方法加EDTA+碳酸氢钠处理了下
三,这次我直接使用蒸馏水透析了5h,然后使用蒸馏水,未发生变化,表示成功了
四,我把20%调低到10%和5%左右了
五,大家帮忙分析下,到底是哪个或者是那些原因
不胜感激!
最后,多谢大家的帮助,我已将最后二十金币分给楼上的四位了
9楼2013-12-10 09:52:00
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dhu小笼包

新虫 (初入文坛)

我最近也在做这个,这是因为产生了凝胶。原因主要有两种:(1)透析温度较高,一般在4摄氏度透析;(2)溶解的SF太多,浓度太大。我这儿有篇讲丝素蛋白溶液稳定性的文章,可以给我发邮件,我再发给你,chengyang1128@126.com
10楼2015-04-12 15:24:38
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