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caoji

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】蛋白质等电点沉淀

请教蛋白质等电点沉淀的问题,我做SOD的等电点沉淀,其等电点为4.1,沉淀之后蛋白不能重新溶解恢复活性?请教这样能使其恢复活性?
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王会征

铁杆木虫 (著名写手)

caoji(金币+1): 2010-10-11 16:56:11
加Urea重新溶解啊,控制好浓度和时间。
2楼2010-10-11 16:41:06
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caoji

银虫 (小有名气)

求具体操作,操作详细,经确认有效金币全部赠送
3楼2010-10-11 16:58:24
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王会征

铁杆木虫 (著名写手)


caoji(金币+1):先加一个,实验成功再多送 2010-10-11 18:49:23
amisking(金币+1):鼓励交流! 2010-10-11 19:47:21
看你蛋白质量的多少啊:如果多的话直接在烧杯中操作即可,算好体积然后加尿素至终浓度1M,看溶解情况,不溶的话继续加尿素至2M,以此类推,差不多到不了4M你的蛋白就变澄清溶解了,注意:整个过程在冰水浴中进行,并用转子不断搅拌。如果蛋白样量少的话可以在透析袋中进行,方法同上,只是平衡的时间要稍微长一些,一般一个浓度(如1M)要平衡2个小时左右。
4楼2010-10-11 17:06:11
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月月大可

木虫 (著名写手)


caoji(金币+1):谢谢参与
caoji(金币+1): 2010-10-12 10:35:23
以我做蛋白的经验看蛋白等点沉淀法慎用!有可能沉了就挂了。不过不绝对!
5楼2010-10-11 19:26:48
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶


caoji(金币+1):谢谢参与
caoji(金币+1): 2010-10-12 10:35:27
我也是,可能因为初次做不清楚,蛋白质全挂了。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
6楼2010-10-11 19:53:43
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x286667863

银虫 (正式写手)

★ ★
caoji(金币+1):谢谢参与
lstt09nk(金币+1):鼓励交流~ 2010-10-12 09:31:38
caoji(金币+1): 2010-10-12 10:35:32
等电点都是结合其他蛋白沉析的方法一起进行的,单独使用好像不常见吧!
7楼2010-10-12 08:48:20
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