24小时热门版块排行榜    

查看: 3073  |  回复: 11

tigerpaw

木虫 (正式写手)

[求助] 关于蛋白分离纯化实验设计思路!!!!!!!急急急

各位高手帮帮忙!!!!!!
实验目的:分离一种胞内蛋白,杂蛋白分子量12-120KD,需要纯化40KD的目的蛋白,但是有一种分子量相近蛋白(43KD)干扰,且目的蛋白与干扰蛋白等电点相差为0.5,那如何设计实验分离目的蛋白,只需总体思路,具体操作不用详述,跪谢!!!
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白质生物学实验经验 资源

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

聪明的人能洞察事物未来的发展趋势,他们在洪水来之前养鸭而不养鸡。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

兴隆

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

tigerpaw(金币+3): 谢谢 2011-05-04 13:01:06
可以试一下不同的方法,比如浊点萃取法、置换色谱法、亲和层析法、亲和色谱法、凝胶电泳、双水相萃取等蛋白质的最新分离纯化技术。
大胆谨慎,客观务实。
2楼2011-05-04 10:19:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

prigogin

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

tigerpaw(金币+2): 言之有理 2011-05-04 13:01:54
亲和、疏水、离子交换等等。

蛋白质间的差别和区分并不是只有分子量和等电点。
3楼2011-05-04 10:28:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lunchlanqi

禁言 (小有名气)

tigerpaw(金币+2): 多谢交流 2011-05-04 19:47:00
本帖内容被屏蔽

4楼2011-05-04 15:47:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xili1026

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

tigerpaw(金币+2): 谢谢 2011-05-04 19:47:42
试一下液相不知道行不行
5楼2011-05-04 16:30:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jacobgo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

tigerpaw(金币+3): 好主意 2011-05-04 19:48:11
分子量相近SEC不行
等电点相近,IEC估计也不行
可以根据疏水性差异尝试盐析沉淀、疏水层析
路遥远,我们一起走
6楼2011-05-04 16:40:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hitzbz

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

tigerpaw(金币+2): 多谢交流 2011-05-05 13:43:00
凝胶和离子基本排除---


试试疏水、反相吧---
stay hungry,stay foolish----------
7楼2011-05-04 20:43:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

inhahu

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

tigerpaw(金币+2): 谢谢 2011-05-05 13:43:12
首先要确定目标蛋白和杂蛋白之间的差别(除了分子量和等电点),然后根据他们某个性质的不同来选取相应的分离方法。
8楼2011-05-05 09:48:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dannyboy

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

tigerpaw(金币+3): 非常感谢 2011-05-05 22:33:43
建议采用疏水作用层析,首选是phenyl hp ,i然后用反相液相进行纯度分析和目标蛋白的定位,
如果你有该目标蛋白的标准品,那更好。
9楼2011-05-05 22:14:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

落满夏天

银虫 (正式写手)

tigerpaw: 回帖置顶 2011-12-06 19:28:45
等电点接近离子交换很难做了,看分子量差距大不大,跑电泳试试,如果有特征结构的话考虑亲和又快纯度又高,还有一个办法就是疏水和反向,应该可以。都不行就从菌种上找找看。
星星之火,可以燎原
10楼2011-12-06 15:47:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tigerpaw 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 博后资助名单出来了 +12 Shxjjxjkx 2024-11-14 14/700 2024-11-15 14:40 by fanfenggui
[教师之家] 大学老师 +10 考研一路顺风 2024-11-13 12/600 2024-11-15 14:01 by 阿荣喝酒
[硕博家园] 实验进度 +9 麻辣烫。 2024-11-11 14/700 2024-11-15 13:14 by hanweiguo
[有机交流] 二甲胺的使用 20+5 太阳谷 2024-11-14 13/650 2024-11-15 13:11 by xiaomei1031
[教师之家] 北大教授何怀宏曾如此描述他的同行 +12 zju2000 2024-11-09 12/600 2024-11-15 12:13 by PJ女神
[基金申请] 求助 +4 Enenenene 2024-11-15 4/200 2024-11-15 09:36 by 榨菜拌青椒
[教师之家] 这种人痛苦吗 +12 2671 2024-11-12 13/650 2024-11-15 07:15 by zju2000
[论文投稿] 找不到审稿人 +5 吉祥如意141913 2024-11-13 5/250 2024-11-15 07:09 by 半生梦君
[论文投稿] 国内期刊审稿人数量 +3 新时代核动力驴 2024-11-13 4/200 2024-11-15 06:33 by steven_198377
[考博] 随缘读博 一篇中科院一区Top 一篇中科院二区Top 两篇专利 +5 Ricoch4t 2024-11-13 14/700 2024-11-15 01:23 by Ricoch4t
[论文投稿] chemical science和advanced science哪个好一点 +5 yly150 2024-11-12 5/250 2024-11-15 01:09 by ca0yan9
[论文投稿] OE返修遇到expired +3 隔壁老王来了 2024-11-14 7/350 2024-11-14 20:46 by 隔壁老王来了
[论文投稿] angew三个小修,返修过去已经20多天了没动静,有朋友遇到这种情况吗? +3 迟迟未到场 2024-11-14 3/150 2024-11-14 17:53 by TopEdit
[基金申请] 76批博后基金 +3 feiyi3986 2024-11-14 3/150 2024-11-14 11:50 by puly
[有机交流] 硫谜用双氧水氧化出现的困惑(老板说一定要用双氧水氧化做好)求指教 10+4 luowenwu 2024-11-10 15/750 2024-11-14 10:52 by luolinfeng
[论文投稿] 二审审一年的佛系编辑 +10 thefoxrain 2024-11-09 15/750 2024-11-12 19:27 by lide966
[论文投稿] 论文接受后,编辑部发邮件提醒缺少附件 15+4 上善若水明泪 2024-11-10 4/200 2024-11-12 14:24 by 北京莱茵润色
[基金申请] 请问:工作单位缺乏条件,青年基金申报书可以写读博学校的实验平台吗? +5 dxmx 2024-11-08 7/350 2024-11-11 23:08 by dxcharlary
[论文投稿] renewable energy 添加作者 15+3 Hebauwww12 2024-11-09 4/200 2024-11-11 08:42 by 北京莱茵润色
[基金申请] 要求论文发表日期在项目执行期内,论文发表日期是在线日期还是见刊日期 +6 Jiangnanyu1 2024-11-09 7/350 2024-11-10 17:49 by jurkat.1640
信息提示
请填处理意见