24小时热门版块排行榜    

查看: 3917  |  回复: 11

tigerpaw

木虫 (正式写手)

[求助] 关于蛋白分离纯化实验设计思路!!!!!!!急急急

各位高手帮帮忙!!!!!!
实验目的:分离一种胞内蛋白,杂蛋白分子量12-120KD,需要纯化40KD的目的蛋白,但是有一种分子量相近蛋白(43KD)干扰,且目的蛋白与干扰蛋白等电点相差为0.5,那如何设计实验分离目的蛋白,只需总体思路,具体操作不用详述,跪谢!!!
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白质生物学实验经验 资源

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

聪明的人能洞察事物未来的发展趋势,他们在洪水来之前养鸭而不养鸡。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

兴隆

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

tigerpaw(金币+3): 谢谢 2011-05-04 13:01:06
可以试一下不同的方法,比如浊点萃取法、置换色谱法、亲和层析法、亲和色谱法、凝胶电泳、双水相萃取等蛋白质的最新分离纯化技术。
大胆谨慎,客观务实。
2楼2011-05-04 10:19:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

prigogin

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

tigerpaw(金币+2): 言之有理 2011-05-04 13:01:54
亲和、疏水、离子交换等等。

蛋白质间的差别和区分并不是只有分子量和等电点。
3楼2011-05-04 10:28:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lunchlanqi

禁言 (小有名气)

tigerpaw(金币+2): 多谢交流 2011-05-04 19:47:00
本帖内容被屏蔽

4楼2011-05-04 15:47:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xili1026

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

tigerpaw(金币+2): 谢谢 2011-05-04 19:47:42
试一下液相不知道行不行
5楼2011-05-04 16:30:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jacobgo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

tigerpaw(金币+3): 好主意 2011-05-04 19:48:11
分子量相近SEC不行
等电点相近,IEC估计也不行
可以根据疏水性差异尝试盐析沉淀、疏水层析
路遥远,我们一起走
6楼2011-05-04 16:40:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hitzbz

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

tigerpaw(金币+2): 多谢交流 2011-05-05 13:43:00
凝胶和离子基本排除---


试试疏水、反相吧---
stay hungry,stay foolish----------
7楼2011-05-04 20:43:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

inhahu

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

tigerpaw(金币+2): 谢谢 2011-05-05 13:43:12
首先要确定目标蛋白和杂蛋白之间的差别(除了分子量和等电点),然后根据他们某个性质的不同来选取相应的分离方法。
8楼2011-05-05 09:48:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dannyboy

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

tigerpaw(金币+3): 非常感谢 2011-05-05 22:33:43
建议采用疏水作用层析,首选是phenyl hp ,i然后用反相液相进行纯度分析和目标蛋白的定位,
如果你有该目标蛋白的标准品,那更好。
9楼2011-05-05 22:14:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

落满夏天

银虫 (正式写手)

tigerpaw: 回帖置顶 2011-12-06 19:28:45
等电点接近离子交换很难做了,看分子量差距大不大,跑电泳试试,如果有特征结构的话考虑亲和又快纯度又高,还有一个办法就是疏水和反向,应该可以。都不行就从菌种上找找看。
星星之火,可以燎原
10楼2011-12-06 15:47:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tigerpaw 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 271求调剂 +12 生如夏花… 2026-03-11 14/700 2026-03-17 10:56 by lovewei0727
[考研] 289求调剂 +6 步川酷紫123 2026-03-11 6/300 2026-03-17 10:23 by Sammy2
[考研] 302求调剂 +8 负心者当诛 2026-03-11 8/400 2026-03-17 09:05 by 哦哦123
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +3 梨花珞晚风 2026-03-17 3/150 2026-03-17 09:04 by 晗晗调剂上岸
[考研] 301求调剂 +3 A_JiXing 2026-03-16 3/150 2026-03-17 08:21 by 无际的草原
[考研] 304求调剂 +5 素年祭语 2026-03-15 5/250 2026-03-16 17:00 by 我的船我的海
[考研] 312求调剂 +3 陌宸希 2026-03-16 4/200 2026-03-16 15:06 by peike
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +3 自由煎饼果子 2026-03-16 3/150 2026-03-16 14:10 by 运气yunqi
[考研] 【0703化学调剂】-一志愿华中师范大学-六级475 +5 Becho359 2026-03-11 5/250 2026-03-14 11:35 by 哦哦123
[考研] 材料080500调剂求收留 +3 一颗meteor 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:54 by peike
[考研] 330求调剂 +3 ?酱给调剂跪了 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:13 by JourneyLucky
[考研] 0703,333分求调剂 一志愿郑州大学-物理化学 +3 李魔女斗篷 2026-03-11 3/150 2026-03-13 22:24 by JourneyLucky
[考研] 26调剂/材料/英一数二/总分289/已过A区线 +6 步川酷紫123 2026-03-13 6/300 2026-03-13 21:59 by 星空星月
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:41 by JourneyLucky
[考研] 310求调剂 +3 【上上签】 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:16 by JourneyLucky
[考博] 福州大学杨黄浩课题组招收2026年专业学位博士研究生,2026.03.20截止 +3 Xiangyu_ou 2026-03-12 3/150 2026-03-13 09:36 by duanwu655
[考研] 321求调剂(食品/专硕) +3 xc321 2026-03-12 6/300 2026-03-13 08:45 by xc321
[考博] 2026年博士申请 +3 QwQwQW10 2026-03-11 3/150 2026-03-12 17:58 by gxch43
[考研] 279求调剂 +3 莫xiao 2026-03-10 4/200 2026-03-11 08:06 by 斩魂滴兔子!
[考研] 调剂 +5 呵唔哦豁 2026-03-10 5/250 2026-03-10 22:00 by 28375m
信息提示
请填处理意见