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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 实验室分析、仪器 » 【求助】蛋白酶解液沉淀无法分离的问题
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吃老鼠的猫

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】蛋白酶解液沉淀无法分离的问题 已有12人参与

我做的是酶解蛋白制备低聚肽，在酶解完成经过沸水浴灭酶之后需要分离酶解液和残留的固体颗粒，将酶解液干燥得到肽粉，现在的问题是：
1、一般采用离心方法分离，不过效果不理想，经13000g的离心力，9000转转速离心之后还是浑浊。
2、沸水浴灭酶后不离心，静置一段时间后反而变得比较澄清了，至少比离心的澄清
现在想要解决的问题就是怎么才能用分离方法将酶解液变得澄清，或者说是采用合适的分离方法将静置之后的上清液和沉淀分开，因为沉淀有一点点晃动就会浑浊，然后就很难再分离了
希望能得到大家的帮助
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1楼 2011-04-06 20:18:15
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吃老鼠的猫

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by junwen6516 at 2011-04-06 21:20:31:
高速离心机呢？

多高速？最高用过14000转的冷冻离心，还是浑浊的
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3楼2011-04-06 21:50:09
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普通回帖

junwen6516

荣誉版主 (知名作家)

优秀版主
高速离心机呢？
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人生若只如初见
2楼2011-04-06 21:20:31
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wwrr

铁虫 (小有名气)
提高灭酶温度，130℃
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4楼2011-04-07 09:33:39
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吃老鼠的猫

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by wwrr at 2011-04-07 09:33:39:
提高灭酶温度，130℃

怎么达到130℃呢？
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5楼2011-04-07 22:29:59
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wwrr

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 吃老鼠的猫 at 2011-04-07 22:29:59:
怎么达到130℃呢？

加压力就行了
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6楼2011-04-08 08:21:14
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king9089

金虫 (小有名气)
抽滤分离
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7楼2011-04-11 08:24:36
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吃老鼠的猫

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 吃老鼠的猫 at 2011-04-07 22:29:59:
怎么达到130℃呢？

我是用普通水浴的，请问要加压的话该用什么设备呢
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8楼2011-04-11 11:00:56
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红景天水

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
junwen6516(金币+1): 换头像了啊，O(∩_∩)O哈哈~ 2011-04-11 14:27:33
沸水浴灭酶15min，快速滤纸抽滤，而后13000g离心15min
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9楼2011-04-11 13:39:18
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吃老鼠的猫

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 红景天水 at 2011-04-11 13:39:18:
沸水浴灭酶15min，快速滤纸抽滤，而后13000g离心15min

谢谢，请问是沸水浴灭酶15min后不经冷却直接抽滤，而后离心吗？
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10楼2011-04-14 15:11:45
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