24小时热门版块排行榜    

查看: 2932  |  回复: 23

吃老鼠的猫

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】蛋白酶解液沉淀无法分离的问题 已有12人参与

我做的是酶解蛋白制备低聚肽,在酶解完成经过沸水浴灭酶之后需要分离酶解液和残留的固体颗粒,将酶解液干燥得到肽粉,现在的问题是:
1、一般采用离心方法分离,不过效果不理想,经13000g的离心力,9000转转速离心之后还是浑浊。
2、沸水浴灭酶后不离心,静置一段时间后反而变得比较澄清了,至少比离心的澄清
现在想要解决的问题就是怎么才能用分离方法将酶解液变得澄清,或者说是采用合适的分离方法将静置之后的上清液和沉淀分开,因为沉淀有一点点晃动就会浑浊,然后就很难再分离了
希望能得到大家的帮助
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

吃老鼠的猫

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by junwen6516 at 2011-04-06 21:20:31:
高速离心机呢?

多高速?最高用过14000转的冷冻离心,还是浑浊的
3楼2011-04-06 21:50:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

junwen6516

荣誉版主 (知名作家)

优秀版主

高速离心机呢?
人生若只如初见
2楼2011-04-06 21:20:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wwrr

铁虫 (小有名气)

提高灭酶温度,130℃
4楼2011-04-07 09:33:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

吃老鼠的猫

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by wwrr at 2011-04-07 09:33:39:
提高灭酶温度,130℃

怎么达到130℃呢?
5楼2011-04-07 22:29:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wwrr

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 吃老鼠的猫 at 2011-04-07 22:29:59:
怎么达到130℃呢?

加压力就行了
6楼2011-04-08 08:21:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

king9089

金虫 (小有名气)

抽滤分离
7楼2011-04-11 08:24:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

吃老鼠的猫

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 吃老鼠的猫 at 2011-04-07 22:29:59:
怎么达到130℃呢?

我是用普通水浴的,请问要加压的话该用什么设备呢
8楼2011-04-11 11:00:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

红景天水

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
junwen6516(金币+1): 换头像了啊,O(∩_∩)O哈哈~ 2011-04-11 14:27:33
沸水浴灭酶15min,快速滤纸抽滤,而后13000g离心15min
9楼2011-04-11 13:39:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

吃老鼠的猫

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 红景天水 at 2011-04-11 13:39:18:
沸水浴灭酶15min,快速滤纸抽滤,而后13000g离心15min

谢谢,请问是沸水浴灭酶15min后不经冷却直接抽滤,而后离心吗?
10楼2011-04-14 15:11:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 吃老鼠的猫 的主题更新
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 3/150 2026-11-10 01:40 by FChKX8meu1ds
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 4/200 2026-11-10 01:29 by FChKX8meu1ds
[考博] 27博士申请 +3 白白白ly 2026-11-09 3/150 2026-11-09 21:39 by szq0819
[文学芳草园] 厉娜 +3 张丹枫1991 2026-11-09 5/250 2026-11-09 16:53 by 张丹枫1991
[考研] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 15/750 2026-11-09 13:19 by Equinoxhua
[考研] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 14/700 2026-11-09 11:52 by GwrQVVR6Oenx
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 16/800 2026-11-09 11:47 by GwrQVVR6Oenx
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 15/750 2026-11-09 11:41 by GwrQVVR6Oenx
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 10/500 2026-11-09 08:00 by IhnEQauGmT3K
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 12/600 2026-11-09 06:32 by l48hFd8Nwae2
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-09 00:14 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 9/450 2026-11-08 22:46 by l48hFd8Nwae2
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:12 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 12/600 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 02:04 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
信息提示
请填处理意见