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吃老鼠的猫

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】蛋白酶解液沉淀无法分离的问题 已有12人参与

我做的是酶解蛋白制备低聚肽,在酶解完成经过沸水浴灭酶之后需要分离酶解液和残留的固体颗粒,将酶解液干燥得到肽粉,现在的问题是:
1、一般采用离心方法分离,不过效果不理想,经13000g的离心力,9000转转速离心之后还是浑浊。
2、沸水浴灭酶后不离心,静置一段时间后反而变得比较澄清了,至少比离心的澄清
现在想要解决的问题就是怎么才能用分离方法将酶解液变得澄清,或者说是采用合适的分离方法将静置之后的上清液和沉淀分开,因为沉淀有一点点晃动就会浑浊,然后就很难再分离了
希望能得到大家的帮助
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吃老鼠的猫

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by junwen6516 at 2011-04-06 21:20:31:
高速离心机呢?

多高速?最高用过14000转的冷冻离心,还是浑浊的
3楼2011-04-06 21:50:09
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普通回帖

junwen6516

荣誉版主 (知名作家)

优秀版主

高速离心机呢?
人生若只如初见
2楼2011-04-06 21:20:31
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wwrr

铁虫 (小有名气)

提高灭酶温度,130℃
4楼2011-04-07 09:33:39
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吃老鼠的猫

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by wwrr at 2011-04-07 09:33:39:
提高灭酶温度,130℃

怎么达到130℃呢?
5楼2011-04-07 22:29:59
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wwrr

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 吃老鼠的猫 at 2011-04-07 22:29:59:
怎么达到130℃呢?

加压力就行了
6楼2011-04-08 08:21:14
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king9089

金虫 (小有名气)

抽滤分离
7楼2011-04-11 08:24:36
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吃老鼠的猫

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 吃老鼠的猫 at 2011-04-07 22:29:59:
怎么达到130℃呢?

我是用普通水浴的,请问要加压的话该用什么设备呢
8楼2011-04-11 11:00:56
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红景天水

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
junwen6516(金币+1): 换头像了啊,O(∩_∩)O哈哈~ 2011-04-11 14:27:33
沸水浴灭酶15min,快速滤纸抽滤,而后13000g离心15min
9楼2011-04-11 13:39:18
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吃老鼠的猫

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 红景天水 at 2011-04-11 13:39:18:
沸水浴灭酶15min,快速滤纸抽滤,而后13000g离心15min

谢谢,请问是沸水浴灭酶15min后不经冷却直接抽滤,而后离心吗?
10楼2011-04-14 15:11:45
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