24小时热门版块排行榜    

查看: 1554  |  回复: 5

炒饭大王

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】盐析后复溶的问题 已有3人参与

酵母破碎后离心得30mL酶液,在20mM pH6.5的磷酸盐缓冲液中加硫酸铵盐析,到50%时有大量沉淀析出,再用10mL 20mM pH6.5的磷酸盐缓冲液却无法复溶,震荡无效果,求解!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
硫酸铵盐析会破坏某些蛋白质的结构,所以盐析后的沉淀是不可能全部溶解的。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2010-08-26 03:06:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

炒饭大王

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2010-08-26 03:06:38:
硫酸铵盐析会破坏某些蛋白质的结构,所以盐析后的沉淀是不可能全部溶解的。

但是其他人的能以很少量的缓冲液溶解,虽然不是同一个菌
3楼2010-08-26 10:22:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
silicare(金币+2):感谢分享 2010-08-26 18:28:44
那是别人牛,我做那么多次从来不能完全溶解的,无论是硫酸铵还是有机溶剂,即使酶活力还能保留100%,也有一半的蛋白质(BCA法测定)被离心下去,8千转10分钟。别人的实验我不了解,我只说我的实验情况。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2010-08-26 14:32:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

炒饭大王

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2010-08-26 14:32:25:
那是别人牛,我做那么多次从来不能完全溶解的,无论是硫酸铵还是有机溶剂,即使酶活力还能保留100%,也有一半的蛋白质(BCA法测定)被离心下去,8千转10分钟。别人的实验我不了解,我只说我的实验情况。

哦,谢谢
5楼2010-08-31 12:43:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梅闲寒笑

金虫 (正式写手)

借鉴,,,
水墨丹青
6楼2010-08-31 15:26:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 炒饭大王 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见