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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】盐析后复溶的问题
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炒饭大王

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】盐析后复溶的问题 已有3人参与

酵母破碎后离心得30mL酶液，在20mM pH6.5的磷酸盐缓冲液中加硫酸铵盐析，到50%时有大量沉淀析出，再用10mL 20mM pH6.5的磷酸盐缓冲液却无法复溶，震荡无效果，求解！
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1楼 2010-08-25 23:17:29
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
硫酸铵盐析会破坏某些蛋白质的结构，所以盐析后的沉淀是不可能全部溶解的。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2010-08-26 03:06:38
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炒饭大王

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2010-08-26 03:06:38:
硫酸铵盐析会破坏某些蛋白质的结构，所以盐析后的沉淀是不可能全部溶解的。

但是其他人的能以很少量的缓冲液溶解，虽然不是同一个菌
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3楼2010-08-26 10:22:39
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
silicare(金币+2):感谢分享 2010-08-26 18:28:44
那是别人牛，我做那么多次从来不能完全溶解的，无论是硫酸铵还是有机溶剂，即使酶活力还能保留100%，也有一半的蛋白质（BCA法测定）被离心下去，8千转10分钟。别人的实验我不了解，我只说我的实验情况。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2010-08-26 14:32:25
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炒饭大王

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2010-08-26 14:32:25:
那是别人牛，我做那么多次从来不能完全溶解的，无论是硫酸铵还是有机溶剂，即使酶活力还能保留100%，也有一半的蛋白质（BCA法测定）被离心下去，8千转10分钟。别人的实验我不了解，我只说我的实验情况。

哦，谢谢
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5楼2010-08-31 12:43:53
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梅闲寒笑

金虫 (正式写手)
借鉴，，，
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水墨丹青
6楼2010-08-31 15:26:37
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