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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 目的条带连接T载体后双酶切不对
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123q明

金虫 (小有名气)

[求助] 目的条带连接T载体后双酶切不对 已有4人参与

目的片段和T载体连接后PCR条带正确，但是双酶切后，目的条带却比正常目的条带大，这是怎么回事呢？
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1楼 2015-06-27 12:14:56
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jiqinger

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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123q明: 金币+2 2015-08-19 13:39:04
是不是双酶切是将目的条带和载体的一段序列一块切下来了。
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123456
2楼2015-06-27 15:24:35
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li245824369

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
123q明: 金币+2 2015-08-19 13:39:10
多切点，切错了很正常。
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3楼2015-06-27 16:31:00
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dehong1573

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
123q明: 金币+2 2015-08-19 13:39:15
直接测序吧，也便宜，测序后可能就知道原因了
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科学永无止境,只有合作共享才能更好地……
4楼2015-06-29 08:18:36
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wuwenmei

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
123q明: 金币+2 2015-08-19 13:39:20
是不是载体上有你的双酶的酶切位点？？、
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下雨天就算没有伞，我也要学会努力奔跑！
5楼2015-06-29 08:56:36
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123q明

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jiqinger at 2015-06-27 15:24:35
是不是双酶切是将目的条带和载体的一段序列一块切下来了。

T载体上有我的酶切位点,但是看了这个图T载体本来是2600多的，这上面怎么是3000左右，我的目的条带 是975，这都1000多了，切好几次都是这个样子，这是我又重新连接的！
目的条带连接T载体后双酶切不对
乳酸菌PMD-BSH(DH5A)双酶切新1.jpg
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6楼2015-07-02 10:14:15
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123q明

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jiqinger at 2015-06-27 15:24:35
是不是双酶切是将目的条带和载体的一段序列一块切下来了。

T载体上有我的酶切位点,但是看了这个图T载体本来是2600多的，这上面怎么是3000左右，我的目的条带 是975，这都1000多了，切好几次都是这个样子，这是我又重新连接的！
目的条带连接T载体后双酶切不对-1
乳酸菌PMD-BSH(DH5A)双酶切新1.jpg
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7楼2015-07-02 10:16:00
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