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liangte0705金虫 (小有名气)
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片段连接到载体后，总在酶切位点处发生缺失 已有3人参与
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| 各位同学，我最近遇到了一个难题。我的一个2900bp大小的片段，通过XhoⅠ和EcoRⅠ两个酶切位点酶切后，连到POK-12载体上，通过pcr鉴定，片段连入了，但酶切鉴定失败，测序后发现从XhoⅠ开始缺失300多bp碱基。我怀疑是片段和宿主菌发生了重组，因此换了许多感受态，例如DH5α，JM109，HB101,但仍然出现上述问题。已经一个多月了，仍然没有解决，请各位同学帮帮忙，看看是不是有什么方法能够解决，多谢大家了。 |
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