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天宇201266

金虫 (正式写手)

[求助] pET-28a质粒被Hind III和Xho I 双酶切之后没有条带,而这两个酶分别单酶切却都有条带 已有1人参与

如题:pET-28a质粒被Hind III和Xho I 这两个酶分别单酶切都有一条带,而用这两个酶进行双酶切时却总是切不开,条带很弥散,跟刷子刷的一样,

pET-28a质粒被Hind III和Xho I 双酶切之后没有条带,而这两个酶分别单酶切却都有条带
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guoliwang

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
检查一下双酶切的条件,两个酶的体积和有没有低于总体积的10%。我通常两个酶各1ul,总体积50ul。因为甘油浓度高抑制酶活性。而枪头外侧吸附的酶体积也不要忽视。
慎思明辨博学笃行
2楼2015-06-18 11:39:08
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