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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » qPCR质粒稀释问题
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yangjingjing

木虫 (正式写手)

[求助] qPCR质粒稀释问题 已有4人参与

质粒用TE稀释，新稀释质粒qPCR的图很好，4度放两天拷贝数3E2，3E1质粒qPCR起线就随机乱舞了~~~~这个是什么情况？为什么TE稀释，质粒稳定性还这么差？求大神帮忙解答
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努力打败一切
1楼 2015-06-11 14:37:29
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

love_st

金虫 (著名写手)
浓度这么低的话首先就不该放置在4℃，随机是什么意思，Ct值往前了么
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2楼2015-06-11 15:06:51
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luwei13566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yangjingjing: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-06-11 16:43:32
稀释质粒后分装好放在-20度冻上，用一管拿一管就没啥问题了。4度确实不合适，TE也不是万能的。

[ 发自小木虫客户端 ]
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大家相互帮助哈
3楼2015-06-11 15:20:40
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yangjingjing

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by love_st at 2015-06-11 15:06:51
浓度这么低的话首先就不该放置在4℃，随机是什么意思，Ct值往前了么

前后随机跑了
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努力打败一切
4楼2015-06-11 16:41:26
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yangjingjing

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by luwei13566 at 2015-06-11 15:20:40
稀释质粒后分装好放在-20度冻上，用一管拿一管就没啥问题了。4度确实不合适，TE也不是万能的。

可是10^4和 10^3怎么变化不大，10^2以下就不行了？
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努力打败一切
5楼2015-06-11 16:43:17
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love_st

金虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yangjingjing at 2015-06-11 16:41:26
前后随机跑了...

质粒如果出现乱跳，你最好线性化
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6楼2015-06-12 09:09:01
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yangjingjing

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by love_st at 2015-06-12 09:09:01
质粒如果出现乱跳，你最好线性化...

菜鸟，不知道啥叫线性化~求指教
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努力打败一切
7楼2015-06-12 10:22:17
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小佳佳佳佳

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我最近实验也 觉得是TE稀释问题，准备换纯水试试。请问你的情况有好转吗？交流下
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8楼2015-06-12 18:23:58
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小佳佳佳佳

新虫 (初入文坛)
请问你是做标准曲线吗？你们用什么机器？我们交流下
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9楼2015-06-12 18:30:48
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yangjingjing

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 小佳佳佳佳 at 2015-06-12 18:23:58
我最近实验也 觉得是TE稀释问题，准备换纯水试试。请问你的情况有好转吗？交流下

更差，而且差的一塌糊涂
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努力打败一切
10楼2015-06-12 23:13:01
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